1,、選用生長情況好,，數(shù)量較多的原代細胞，凍存前一天換液一次,。
2,、貼壁細胞需用 0.25％胰酶常規(guī)消化將細胞消化下來，將細胞懸液收集至離心
管中,。
3,、1000rpm 離心 5 分鐘，棄上清液,。
4,、沉淀加含 DMSO 的培養(yǎng)液，計數(shù)，調(diào)整至（1-10）×10
6/ml,。
5,、將懸液分至凍存管中，每管 1 ml,。
6,、密封凍存管，封口一定要嚴,，否則復蘇時易出現(xiàn)爆裂,。
7、用記號筆標明細胞種類,，凍存日期,。
8、按下列順序降溫：室溫→4℃（20 分鐘〕→冰箱冷凍室（30 分鐘）→超低溫
冰箱（－80℃過夜）→液氮,。