小鼠主動脈內(nèi)皮細胞凍存方法:
待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行小鼠主動脈內(nèi)皮細胞|細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
小鼠主動脈內(nèi)皮細胞復蘇的原則:
快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使小鼠主動脈內(nèi)皮細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化,,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,,對細胞造成損害。
小鼠主動脈內(nèi)皮細胞分離自主動脈組織,;主動脈是體循環(huán)的動脈主干,。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓,,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈,;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈,;髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內(nèi),、外動脈。主動脈內(nèi)皮細胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細胞,,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),,當其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導致一些心血管疾病的發(fā)生。因此,,主動脈內(nèi)皮細胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機制及治療藥物不可缺少的工具,。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成,。它形成血管的內(nèi)壁,,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),,由心臟直至最小的微血管,。