人真皮纖維原細(xì)胞提取于成人皮膚組織,,原代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×105cells/ml,,此細(xì)胞通過Fibronectin免疫熒光染色驗證,,經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。細(xì)胞可以達(dá)到15倍增,。
成纖維細(xì)胞是來源于中胚層的一種間充質(zhì)細(xì)胞,。它被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和分子生物學(xué)的研究。這主要是因為它是一種較容易培養(yǎng)的,,耐受性較好的細(xì)胞,,可應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)染、顯微注射等多種操作?,F(xiàn)已證明不同部位的成纖維細(xì)胞有著本質(zhì)的不同,,組織里的成纖維細(xì)胞處于一種動態(tài)的平衡之中,這種平衡影響著健康,,以及已愈合軟組織的結(jié)構(gòu)完整性,。成纖維細(xì)胞分泌一種非剛性細(xì)胞外基質(zhì),其中含有I型和III型膠原質(zhì),。此外真皮纖維細(xì)胞在炎癥刺激下還能分泌大量透明質(zhì)酸,。在創(chuàng)傷愈合過程中,,真皮成纖維細(xì)胞從遷移、再生表型轉(zhuǎn)變?yōu)榭墒湛s,、基質(zhì)聚集表型,。
人真皮成纖維細(xì)胞分離自真皮組織;真皮,,位于表皮深層,,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,,埋于基質(zhì)內(nèi),。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,,又有韌性,。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白,、彈性纖維以及基質(zhì),。
成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。
剛分離的真皮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁完全,,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。
細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。真皮成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),,合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。