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小鼠心肌細(xì)胞使用方法和注意事項(xiàng)

時間:2022-10-13 閱讀:298
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  小鼠心肌細(xì)胞分離自小鼠胚胎心臟組織,,細(xì)胞呈多邊形等不規(guī)則形狀,,2天以后大部分伸出偽足呈巴掌狀部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動,成熟的心肌細(xì)胞增殖緩慢或不增殖,。體外培養(yǎng)的小鼠心肌細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。小鼠心肌細(xì)胞采用混合酶解法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,,細(xì)胞純度可達(dá)80%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
  小鼠心肌細(xì)胞使用方法:
  1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,,拆下封口膜,,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
  2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
  3.細(xì)胞傳代
  1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
  2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化,;
  3)用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
  4)待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
  小鼠心肌細(xì)胞注意事項(xiàng):
  1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月
  2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作
  3.傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)
  4.該細(xì)胞只可用于科研

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