5
小鼠心肌細胞使用方法和注意事項
小鼠心肌細胞分離自小鼠胚胎心臟組織,，細胞呈多邊形等不規(guī)則形狀，2天以后大部分伸出偽足呈巴掌狀部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動，成熟的心肌細胞增殖緩慢或不增殖,。體外培養(yǎng)的小鼠心肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。小鼠心肌細胞采用混合酶解法制備而來,，細胞總量約為5×105cells/瓶，細胞純度可達80%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
小鼠心肌細胞使用方法：
1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2.待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3.細胞傳代
1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4)待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
小鼠心肌細胞注意事項：
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月
2.在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作
3.傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)
4.該細胞只可用于科研