氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,，不僅是各種病原體,、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng),。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此,，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要,。

　　人氣管上皮細(xì)胞分離自氣管組織；氣管（Trachea）,，呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四,、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處,，分左、右主支氣管,，分叉處稱為氣管杈,。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性,，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán),，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,，表面覆蓋纖毛上皮,，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,，以凈化吸入的氣體,。

　　人氣管上皮細(xì)胞傳代方法：

　　收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況：

　　如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液,，加新的10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

　　如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

　　1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次,。

　　2. 加0.5ml消化液（0.125%Trypsin-0.25mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)過來大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細(xì)胞隨即脫落下來,。

　　3. 加入6-8mlDMEM＋１０％ＦＢＳ培養(yǎng)液或１-２ｍｌ胰酶抑制劑，吸入離心管,，離心（１０００轉(zhuǎn),，6分鐘），棄上清,，　加１０ｍｌＬＨＣ－８將細(xì)胞重懸,，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二或三,。

　　注：1,、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。

　　2,、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。