原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng),。因此,,較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),,如果是正常細(xì)胞,,仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上,,通常把第一代至第十代以?xún)?nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng),。
常用的原代細(xì)胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,,加入培養(yǎng)基后進(jìn)行培養(yǎng),。
分散細(xì)胞培養(yǎng)大致步驟為:
將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出離散成單個(gè)細(xì)胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),,使細(xì)胞得以生存,、生長(zhǎng)和繁殖(注意整個(gè)過(guò)程無(wú)菌)。
原代細(xì)胞的基因表達(dá)分析能使研究者更好的理解生物學(xué)通路和疾病進(jìn)程,,如細(xì)胞周期規(guī)律,,干細(xì)胞生物學(xué),癌癥發(fā)展和神經(jīng)紊亂等,。原代細(xì)胞成為追求突破和更好療法的有力工具,。
雖然原代細(xì)胞有諸多優(yōu)點(diǎn),但獲得高純度的原代細(xì)胞是一個(gè)艱巨的過(guò)程,。比起細(xì)胞系,,原代細(xì)胞可謂是極其敏感,需要額外添加經(jīng)典培養(yǎng)基所沒(méi)有的營(yíng)養(yǎng),。原代細(xì)胞要在專(zhuān)為每種細(xì)胞定制的特殊培養(yǎng)液中存活和生長(zhǎng),。例如內(nèi)皮細(xì)胞與上皮細(xì)胞或神經(jīng)元的營(yíng)養(yǎng)需求就大為不同,因此需要不同的特殊培養(yǎng)基,。
優(yōu)點(diǎn)
(1) 細(xì)胞剛離開(kāi)機(jī)體,,生物學(xué)性狀與原體內(nèi)細(xì)胞比較接近,相比之下,,細(xì)胞系的一個(gè)缺點(diǎn)是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型,,而原代細(xì)胞保持了細(xì)胞在體內(nèi)的許多重要標(biāo)志和功能,。
(2) 細(xì)胞的初代培養(yǎng)也是建立各種細(xì)胞株(系)的必經(jīng)階段。
應(yīng)用:
1,、為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng),、代謝、繁殖提供有力的手段,;
2,、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;
3,、服務(wù)于臨床實(shí)踐,,用于藥物篩選等。