人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺組織,；肺是機(jī)體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生,、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng),。細(xì)胞呈梭形或多角形,，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障,，該屏障對于肺氣體交換,，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。

　　人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法：

　　1. 將肺組織至于無菌的培養(yǎng)皿中用含雙抗的1×PBS（pH=7.4）清洗若干次至無明顯血細(xì)胞,；

　　2. 剪取肺組織邊緣微血管豐富的組織,，用含雙抗的1×PBS（pH=7.4）清洗兩次；

　　3. 將剪取的肺邊緣組織剪成2-3mm3 大小,，加入含雙抗的1×PBS（pH=7.4）清洗；

　　4. 用進(jìn)行過滅菌處理的玻璃滴管將剪碎的組織塊和清洗用的1×PBS（pH=7.4）一起轉(zhuǎn)入15ml離心管中,；

　　5. 250rpm/min離心2 min,，小心傾去液體，再加入適量的含雙抗的1×PBS（pH=7.4）,，用玻璃滴管吹吸液體以清洗組織塊,；

　　6. 繼續(xù)250rpm/min離心2 min，小心傾去液體,，重復(fù)上述步驟若干次,，直至離心后的液體中觀察不到明顯的紅色,；

　　7. 將清洗好的組織塊重新轉(zhuǎn)至無菌的培養(yǎng)皿中，用無菌的200 ml的吸頭將組織塊貼于25cm2 培養(yǎng)瓶中,；

　　8. 加入2ml培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶倒置放于37℃、5%CO2 的培養(yǎng)箱中2-3h之后正置培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),；

　　9. 培養(yǎng)若干天后,，可觀察到組織塊周圍陸續(xù)有細(xì)胞爬出，繼續(xù)培養(yǎng)幾天,，直至組織塊周圍的細(xì)胞達(dá)到較高密度（培養(yǎng)其間兩天換液一次,，換液操作時(shí)動(dòng)作一定要輕柔，以防組織塊被搖下）,；

　　10. 當(dāng)組織塊附近的細(xì)胞生長到較高密度后,，將貼壁的組織塊吹下，換新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24,；

　　11. 24h后,，用0.25%的Trypsin-EDTA消化細(xì)胞，F(xiàn)BS中止消化,，將消化后的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入15ml離心管,，1000rpm/min離心5min，之后傾去廢液,，用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，轉(zhuǎn)入原來的培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)在37℃,、5%CO2 的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

　　以上就是人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)介紹，供大家參考,。