血管內(nèi)皮細(xì)胞是位于循環(huán)血液與血管壁內(nèi)皮下組織之間的單層細(xì)胞,。血管內(nèi)皮細(xì)胞在血栓與止血,、血管新生、輻射損傷,、炎癥及免疫反應(yīng)等一系列重要的病理生理過程起著重要的作用,。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)和鑒定方法：采用胰蛋白酶行臍靜脈兩次酶灌注消化法獲取內(nèi)皮細(xì)胞。分別在倒置相差顯微鏡,、透射電鏡下觀察,，SP免疫組化法行Ⅷ因子抗原鑒定。觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)的生長情況,，并繪制細(xì)胞生長曲線,。

 

1、內(nèi)分泌功能：內(nèi)皮細(xì)胞能通過膜受體途徑感知血流動力學(xué)變化和血液傳遞的信號,，并在接受物理和化學(xué)刺激后合成和分泌多種血管活性物質(zhì),，這些介質(zhì)在局部作用于血管，從而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng),。??    

2,、抗血栓作用：內(nèi)皮細(xì)胞分泌的前列環(huán)素是強效的血小板聚集抑制劑。一些激活血小板的刺激物如二磷酸腺苷(ADP),、三磷酸腺苷(ATP)同時也刺激內(nèi)皮細(xì)胞釋放前列環(huán)素,從而抑制血小板栓子的形成,。此外,，內(nèi)皮細(xì)胞受去甲腎上腺素,、凝血酶、血管加壓素或血管內(nèi)血流淤滯等刺激,，可能還分泌人組織纖溶酶原激活劑(t-PA),具有明顯的纖溶作用,。

3、調(diào)節(jié)血管張力：在藥物和生理因素的刺激下,，內(nèi)皮合成釋放一系列舒張或收縮血管的物質(zhì),，調(diào)節(jié)其下平滑肌的緊張度。此外,，內(nèi)皮細(xì)胞還具有調(diào)控血小板,、白細(xì)胞與血管壁的相互作用,；控制血管生長；介導(dǎo)炎癥和免疫反應(yīng),；調(diào)節(jié)脂質(zhì)氧化,；調(diào)控血管滲透性等功能。

 

1971年,，F(xiàn)olkman提出了“腫瘤生長依賴血管形成",，控制腫瘤生長的新途徑-抗血管新生（anti-angiogenesis）治療的設(shè)想。血管新生（angiogenesis）是內(nèi)皮細(xì)胞的激活,、增殖,、遷移、血管基底膜的降解,、血管和血管網(wǎng)的形成,；并且已存在的血管網(wǎng)的連接等復(fù)雜過程。1989年Gospodarowicz等從牛的垂體濾泡細(xì)胞中分離出一種能選擇性促進血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂的蛋白質(zhì),，將其稱為血管內(nèi)皮生長因子（VEGF,，也稱為VEGF-A）。隨后,，發(fā)現(xiàn)了VEGF的其他家族成員：VEGF-B,、C、D和胎盤生長因子（PIGF）,。VEGF可由多種細(xì)胞分泌,，如內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及一些間質(zhì)和基質(zhì)細(xì)胞,。VEGF在成人和動物的正常組織中合成很少,，但在胎兒、胎盤,、黃體及大部分人類腫瘤等存在血管新生的組織中高表達,。 VEGF也是增加血管通透性的物質(zhì)之一。微血管對蛋白的通透性的增加是血管形成的關(guān)鍵,。血漿蛋白的漏出和血管外纖維蛋白基質(zhì)的形成為內(nèi)皮細(xì)胞生長,、遷移所必需的。

 

（1） VEGF通過增強小血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的囊泡,、細(xì)胞器,、囊狀結(jié)構(gòu)的活性來促進血管腔內(nèi)和腔外血漿成分代謝，以及通過對鈣粘蛋白/鏈蛋白復(fù)合體的作用使單層內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附連接松解,，從而提高循環(huán)代謝中小血管通透性,。血管通透性增加可使血漿蛋白外滲并形成細(xì)胞外基質(zhì)，引起內(nèi)皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

（2） VEGF刺激內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生纖溶酶原激活物(uPA和tPA),、纖溶酶原激活物抑制劑-1（PAI-1）和膠原酶,，并使蛋白分解增加而引起血管外基質(zhì)成分改變，為內(nèi)皮細(xì)胞遷移創(chuàng)造條件,。

（3） VEGF刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖,，VEGF僅可刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖，而不能刺激其他類型細(xì)胞如角膜內(nèi)皮細(xì)胞,、晶狀體上皮細(xì)胞,、纖維母細(xì)胞及腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞的增殖。

（4） VEGF促進內(nèi)皮細(xì)胞的遷移,，這是從血管前體形成內(nèi)皮分支重要的一步,。

（5） VEGF抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。

 

（1） VEGF是主要的腫瘤血管新生因子,。VEGF mRNA在大量的人腫瘤上調(diào),。在鼠模型中抑制VEGF活性導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞系生長的抑制。

（2） VEGF抑制劑用于腫瘤病人的臨床實驗,，包括人源化的抗-VEGF抗體,、抗-KDR抗體和KDR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的各種小分子抑制劑。在非小細(xì)胞肺癌和轉(zhuǎn)移的直腸結(jié)腸癌的病人,，抗-VEGF抗體與常規(guī)化療結(jié)合應(yīng)用可延長生存期,。抗-VEGF抗體單藥應(yīng)用于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的乳腺癌病人顯示有臨床療效,。小分子的KDR抑制劑-SU5416的臨床實驗證實對轉(zhuǎn)移的直腸結(jié)腸癌病人有效,。

（3） 與年齡有關(guān)的黃斑變性（AMD）中腫瘤樣血管形成是視覺減退的主要原因，并導(dǎo)致*失明,。AMD相關(guān)的脈絡(luò)膜腫瘤樣血管形成的進展中起主要作用,。