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原代細胞凍存技術(shù)
1,、選用生長情況好，數(shù)量較多的原代細胞,，凍存前一天換液一次,。
2、貼壁細胞需用0.25％胰酶常規(guī)消化將細胞消化下來,，將細胞懸液收集至離心管中,。
3、1000rpm離心5分鐘,，棄上清液,。
4、沉淀加含DMSO的培養(yǎng)液,，計數(shù),，調(diào)整至（1-10）×106/ml。
5,、將懸液分至凍存管中,，每管1 ml。
6,、密封凍存管,，封口一定要嚴，否則復(fù)蘇時易出現(xiàn)爆裂,。
7,、用記號筆標(biāo)明細胞種類，凍存日期,。
8,、按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃過夜）→液氮。
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