一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代
1,、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,。
2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中,。
3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察,，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,，在還未漂起時(shí)，棄去消化液,，加入培養(yǎng)液終止消化,。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。

二,、懸浮細(xì)胞的傳代
1、直接傳代
① 讓?xiě)腋〖?xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,，將上清吸掉1/2-2/3,。
② 用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
2、離心法傳代
① 將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，離心800-1000rpm,，5分鐘。
② 去除上清,，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),，用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液。
③ 將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。