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GC-1 spg小鼠精原細胞系2

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產(chǎn)品名稱:GC-1spg小鼠精原細胞系,、GC-1spg小鼠精原細胞系,、GC-1spg小鼠精原細胞系,、GC-1spg小鼠精原細胞系,;細胞介紹該細胞是B型精原細胞通過轉(zhuǎn)染pSV3-neo(含有SV40大T抗原和耐藥編碼序列的質(zhì)粒)而產(chǎn)生的永生化,,細胞表達兩種睪丸特異性異蛋白,,和乳酸脫氫酶C4
產(chǎn)品名稱:GC-1 spg小鼠精原細胞系、GC-1 spg小鼠精原細胞系,、GC-1 spg小鼠精原細胞系,、GC-1 spg小鼠精原細胞系;細胞介紹 該細胞是B型精原細胞通過轉(zhuǎn)染pSV3-neo(含有SV40大T抗原和耐藥編碼序列的質(zhì)粒)而產(chǎn)生的永生化,,細胞表達兩種睪丸特異性異蛋白,,和乳酸脫氫酶C4。 細胞特性 1)來源:睪丸 2)形態(tài):神經(jīng)元 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式 (1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇,; (2)存活細胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 (3)收到細胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系。 細胞用途: 僅供科研使用,。 細胞接收后的處理 1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們,。 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的培養(yǎng)基,。 4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。 5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。 細胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備 1) 準備DMEM(GIBCO,貨號12800017,,添加NaHCO3 1.5g/L),培養(yǎng)基,;北美胎牛血清,,10%;雙抗,,1%,; 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細胞處理: 1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。 下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。 3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 培養(yǎng)細胞時請注意 (1)傳代時細胞的接種密度應(yīng)控制在 1萬-4萬 活細胞/平方厘米,。 (2)選用高質(zhì)量的胎牛血清配制培養(yǎng)液。



南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻發(fā)表,被國內(nèi)外多所大學(xué),、研究機構(gòu)和藥學(xué)平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次,。公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認可。
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