產(chǎn)品名稱：BT-B人膀胱癌細(xì)胞、BT-B人膀胱癌細(xì)胞,、BT-B人膀胱癌細(xì)胞,、BT-B人膀胱癌細(xì)胞細(xì)胞特性 1） 來源：宮頸癌 2） 形態(tài)：上皮樣，貼壁細(xì)胞 3） 含量：>1x106 個/mL 4） 污染：支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 （1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,； （2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 （3）收到細(xì)胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途： 僅供科研使用,。 細(xì)胞接收后的處理： 1） 收到細(xì)胞后,，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們。 2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行,，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,，同時給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。 3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。 4） 貼壁細(xì)胞：在運輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。 5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）。 6） 備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備： 1） 準(zhǔn)備1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；雙抗,，1%,。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 3） 凍存細(xì)胞：凍存細(xì)胞時用細(xì)胞計數(shù)器對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)確定凍存管數(shù)，用FBS重懸細(xì)胞,，然后加入一定量的DMSO,，輕輕混合均勻后移入到凍存管中，DMSO終濃度為10%,。 二． 細(xì)胞處理： 1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至6ml,。 2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。 對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化,。 3. 輕輕吹打后吸出,，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4 . 收到細(xì)胞后傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行,。 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為類,； 1,，細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1-2ml（含EDTA）,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2-3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和等體積的凍存液，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%,，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識,。 3，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞、 外泌體、ELISA 試劑盒,、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,，被國內(nèi)外多所大學(xué),、研究機構(gòu)和藥學(xué)平臺使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
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抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。


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