產(chǎn)品名稱：MCF-10A人乳腺細(xì)胞,、MCF-10A人乳腺細(xì)胞,、MCF-10A人乳腺細(xì)胞、MCF-10A人乳腺細(xì)胞細(xì)胞特性 1） 來(lái)源：人 2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣,，貼壁生長(zhǎng) 3） 含量：>1x106 4） 污染：支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 （1）干冰運(yùn)輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,； （2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 （3）收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途： 僅供科研使用,。 細(xì)胞接收后的處理： 1） 收到細(xì)胞后,，請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。 2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行,，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。 3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。 4） 貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng),，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）,。 5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）,。 6） 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 ,。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備： 1） 準(zhǔn)備MEGM kit（Lonza/Clonetics,CC-3150）培養(yǎng)基,包括500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基和5ml因子,；cholera toxin(Sigma,C8052) 100ng/ml, 終止消化用刀豆蛋白酶. 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 3） 凍存液：92.5%培養(yǎng)基,，7.5%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。 二． 細(xì)胞處理： 1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml,。24-48h后換液。 2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆抑制劑終止消化。 3. 輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4. 將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 注：次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為類,； 1,，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml0.1%大豆抑制劑終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2,，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入DMSO,，輕輕混勻，DMSO終濃度為7.5%,，細(xì)胞密度1-2xE6/ml,，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。 3,，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

南京萬(wàn)木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體、ELISA 試劑盒,、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
3、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室,、研發(fā)中心,，動(dòng)物房 ,；
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6,、研發(fā),、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人、大小鼠,、牛,、兔、山羊,、倉(cāng)鼠,、豬、馬,、雞,、犬,、豚鼠,、猴、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo),；
抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富，一抗 1 萬(wàn)余種,，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種,。,；