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更新時(shí)間:2025-04-24 11:34:11瀏覽次數(shù):72次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)U251-LUC人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)
產(chǎn)品名稱:SNB-19人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,、SNB-19人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,、SNB-19人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,、SNB-19人膠質(zhì)瘤細(xì)胞細(xì)胞特性 1) 來源:膠質(zhì)瘤 2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,,貼壁生長 3) 含量:>1x106 4) 污染:支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 (1)干冰運(yùn)輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇; (2)存活細(xì)胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 (3)收到細(xì)胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途: 僅供科研使用,。 細(xì)胞接收后的處理: 1) 收到細(xì)胞后,,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們,。 2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20×物鏡下,,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。 3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。 4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。 5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。 6) 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;雙抗,,1%,。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 注:次傳代推薦傳代比例為1:2,,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。 3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。 下面T25瓶為類; 1,,細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2,,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識,。 3,,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體、ELISA 試劑盒,、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,,被國內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
品牌優(yōu)勢
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢:產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,;
2,、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測才可出庫,;
3,、實(shí)力強(qiáng)大: 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,,動(dòng)物房 ,;
4、技術(shù)支持:技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問題及時(shí)解答,;
5,、服務(wù)周到:發(fā)貨及時(shí),三個(gè)工作日順豐快遞,;售后無憂,,包退包換。
6,、研發(fā),、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:ELISA 試劑盒:人、大小鼠,、牛,、兔、山羊,、倉鼠,、豬、馬,、雞,、犬、豚鼠,、猴,、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo);
抗體:兔多抗,、鼠單抗種類豐富,,一抗 1 萬余種,二抗 100 多種,;
重組蛋白:多項(xiàng)發(fā)明,,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。
staining was stopped with FBS-containing medium for 10 min. The CFSE-stained tumor cells were cocultured with T cells at E:T ratios of 1:1, 2:1, and 5:1 for 6 h in a 37,。C incubator. After coculture, 1 lg mL- 1
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