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HT115(DE3)大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品信息：

組成 BC216-01

HT115(DE3) Competent cells 20×100µl

pUC19(0.1ng/µl） 5µl

儲(chǔ)存條件：-70℃保存,，避免反復(fù)凍融,。

產(chǎn)品說明：

HT115(DE3)是 RNase III 缺陷型大腸桿菌菌株,，可以用 IPTG 誘導(dǎo)方法表達(dá)生產(chǎn) dsRNA。用于 RNAi 干擾試驗(yàn),。該菌株又具備λ噬菌體

DE3 區(qū),，可以表達(dá) T7 RNA 聚合酶，適用于含有 T7 啟動(dòng)子的原核表達(dá)載體（如 pET 等）的高效表達(dá),。非 T7 啟動(dòng)子的表達(dá)載體（如 pGEX,，

pMal，pTrc 等載體）也可以在該菌株中表達(dá),。HT115(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制成,，pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá) 1×10 6 cfu/μg DNA。

基因型：F- mcrA mcrB, IN(rrnD-rrnE)1 rnc14::Tn10λ(DE3 lavUV5::T7 polymerase)

菌株抗性：對(duì)氨芐,、,、、和敏感,。具有四環(huán)素抗性,。

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟：

1. 將感受態(tài)細(xì)胞置于冰水浴中化凍。待細(xì)胞剛化凍后,，加入目的質(zhì)粒到細(xì)胞中,，用手指管底，輕輕混勻；

2. 冰水浴中放置 30 分鐘,，不要晃動(dòng),；

3. 42℃熱擊 60 秒鐘，不要晃動(dòng),；

4. 冰水浴中放置 2 分鐘,，不要晃動(dòng)；

5. 加入 500μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,；

6. 置于 37℃搖床中,，150-200rpm 震蕩復(fù)蘇培養(yǎng) 60 分鐘；

7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上,。待液體吸干后,，倒置平板，37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí),。

（平板劃線分離法：復(fù)蘇培養(yǎng)結(jié)束后,，12000rpm 離心 30 秒鐘，棄掉上清,，留 100μl 左右的液體,，用 200μl 吸頭輕輕吹打散菌塊,，取 10μl

重懸的菌液分多點(diǎn)滴在平板上,，傾斜吸頭,，用吸頭頭部的側(cè)面將滴在平板上的液體來回劃線,。這個(gè)方法可以獲得更多更大的單克隆菌落,。）

（質(zhì)粒快速轉(zhuǎn)化步驟：對(duì)于氨芐抗性的質(zhì)粒，將步驟 2 的時(shí)間縮短到 5 分鐘,，步驟 4 完成后,，可直接涂布或劃線于含氨芐

抗性的 LB 平板上。其它抗性的質(zhì)粒仍需 60 分鐘的復(fù)蘇培養(yǎng),。）

蛋白表達(dá)步驟：

1. 挑取單菌落，接種到含 5ml 帶抗生素的 LB 培養(yǎng)基中,；

2. 37℃,，200rpm 震蕩培養(yǎng)細(xì)菌至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（OD600=0.4-0.8）；

3. 加入 IPTG 到終濃度為 0.4mM,，37℃誘導(dǎo) 2-4 小時(shí)或 16℃誘導(dǎo)過夜,；

4. 誘導(dǎo)完成后，離心收集菌體,，用合適的方法（如考馬斯亮藍(lán)染膠法,，Western-Blot 法或酶活性分析法）分析菌體裂解物的總蛋白,、上

清和沉淀組分,，明確表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)狀況（可溶性或不溶性表達(dá)）；

5. 大量表達(dá)時(shí),，可用 10ml 過夜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到 1L 培養(yǎng)基中，當(dāng)培養(yǎng)到 OD600=0.4-0.8 時(shí),，加入終濃度為 0.4mM 的 IPTG,，37℃誘導(dǎo) 2-4

小時(shí)或 16℃誘導(dǎo)過夜。（不同蛋白表達(dá)的條件有所不同,，需在實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化,。）

E 、感受態(tài)細(xì)胞
E-1 ,、大腸桿菌克隆感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC101-01	0 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC101-02	0 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC102-01	DH5α 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC102-02	DH5α 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC103-01	JM109 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC103-02	JM109 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC104-01	XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC104-02	XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC105-01	Mach 1-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC105-02	Mach 1-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC117-01	Turbo 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×10	包
BC117-02	Turbo 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC118-01	Stable 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC106-01	DH10B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC106-02	DH10B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC107-01	OmniMAX2-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC107-02	OmniMAX2-T1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC108-01	Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC115-01	Stbl4 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC109-01	XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC110-01	JM110 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC111-01	DB3. 1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC112-01	DH10BAC 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC113-01	NEB 10-beta 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC114-01	BJ5183-AD- 1 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
E-2 ,、大腸桿菌表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC201-01	BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC201-02	BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC202-01	BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC202-02	BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC203-01	M15 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC203-02	M15 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC204-01	Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC204-02	Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC205-01	OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC205-02	OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC206-01	T7 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC206-02	T7 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC207-01	T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC207-02	T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC208-01	Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC208-02	Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
BC209-01	Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×10	包
BC209-02	Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞	100μl ×20	包
E-3 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC401-01	NEB 10-beta 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC402-01	BJ5183 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC403-01	BJ5183-AD- 1 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC404-01	0 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC405-01	DH5α 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
E-4 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC301-01	LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC302-01	AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC303-01	EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
BC304-01	GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞	100ul ×20	包
E-5 、農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	單位
BC305-01	LBA4404 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC306-01	AGL1 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受電轉(zhuǎn)態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC307-01	EHA105 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包
BC308-01	GV3101 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞	50μl ×20	包

南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、外泌體、ELISA 試劑盒,、抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝、神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
3、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室,、研發(fā)中心,，動(dòng)物房；
4,、技術(shù)支持：技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問題及時(shí)解答,；
5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí),，三個(gè)工作日順豐快遞,；售后無憂,，包退包換。
6,、研發(fā),、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人、大小鼠,、牛,、兔、山羊,、倉(cāng)鼠,、豬、馬,、雞,、犬、豚鼠,、猴,、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo)；
抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。