本試劑盒采用雙抗體夾心兩步法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中,，加入人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)校準(zhǔn)品和待測樣本,，再加入shengwusu標(biāo)記抗體，經(jīng)過溫育與充分洗滌后,，再加入HRP偶聯(lián)的親和素,，經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分,，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-shengwusu標(biāo)記抗體-親和素酶的夾心復(fù)合物,。加底物A和B，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,，在終止液作用下,，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度（OD值）,，吸光度（OD值）與待測樣品中人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)的濃度正相關(guān),。擬合校準(zhǔn)品曲線,，可以計(jì)算出樣本中人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)的濃度,。