本試劑盒采用雙抗體夾心兩步法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。在預(yù)包被抗人白蛋白(ALB)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中,，加入人白蛋白(ALB)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入shengwusu標(biāo)記抗體,，經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌后，再加入HRP偶聯(lián)的親和素,，經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分,，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-shengwusu標(biāo)記抗體-親和素酶的夾心復(fù)合物,。加底物A和B，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,，在終止液作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色,，在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)上測(cè)定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中人白蛋白(ALB)的濃度正相關(guān),。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中人白蛋白(ALB)的濃度,。
操作步驟
推薦樣本稀釋方案：建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索樣本適合稀釋倍數(shù),，然后再做正式實(shí)驗(yàn)。
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,，標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品,，建議做復(fù)孔。
1,、按前面說(shuō)明書(shū)描述的方法,，配制好試劑盒各種組分的工作液,。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
3,、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、yangben稀釋液孔,、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,，yangben稀釋液孔加yangben稀釋液50μL，空白孔不加,，樣本孔加待測(cè)樣本50μL,。除空白孔外，每孔加入shengwusu抗體100uL,，用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育60min,。
4、揭開(kāi)封板膜,，棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)5次,。若使用自動(dòng)洗板機(jī),，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s的程序,，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,，加底物前,，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板,。
5、除空白孔外,，每孔加入HRP標(biāo)記親和素100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育20min,。
6、重復(fù)步驟4,。
7、將底物A和B按1:1體積充分混合,，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育15min。
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,，標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品,，建議做復(fù)孔。
1,、按前面說(shuō)明書(shū)描述的方法,，配制好試劑盒各種組分的工作液,。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
3,、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、yangben稀釋液孔,、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,，yangben稀釋液孔加yangben稀釋液50μL，空白孔不加,，樣本孔加待測(cè)樣本50μL,。除空白孔外，每孔加入shengwusu抗體100uL,，用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育60min,。
4、揭開(kāi)封板膜,，棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)5次,。若使用自動(dòng)洗板機(jī),，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s的程序,，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,，加底物前,，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板,。
5、除空白孔外,，每孔加入HRP標(biāo)記親和素100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育20min,。
6、重復(fù)步驟4,。
7、將底物A和B按1:1體積充分混合,，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育15min。
8,、所有孔加入終止液50μL，在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）,。
備注：圖片僅供參考。僅供科研,，不可用于臨床。
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