本試劑盒采用雙抗體夾心兩步法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。在預(yù)包被抗人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中,，加入人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,，再加入shengwusu標(biāo)記抗體,，經(jīng)過溫育與充分洗滌后,，再加入HRP偶聯(lián)的親和素，經(jīng)過溫育與充分洗滌,，去除未結(jié)合的組分,，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-shengwusu標(biāo)記抗體-親和素酶的夾心復(fù)合物。加底物A和B，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,，在終止液作用下,，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)上測(cè)定吸光度（OD值）,，吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)的濃度正相關(guān),。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)的濃度,。
操作步驟
推薦樣本稀釋方案：建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索樣本適合稀釋倍數(shù),，然后再做正式實(shí)驗(yàn)。
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,，標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔,。
1、按前面說明書描述的方法,，配制好試劑盒各種組分的工作液,。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
3、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、yangben稀釋液孔,、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,，yangben稀釋液孔加yangben稀釋液50μL,，空白孔不加，樣本孔加待測(cè)樣本50μL,。除空白孔外,，每孔加入shengwusu抗體100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育60min,。
4、揭開封板膜,，棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)5次,。若使用自動(dòng)洗板機(jī),，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s的程序,，可以提高檢測(cè)的精度,。洗板結(jié)束，加底物前,，要在干凈不掉屑的紙上,，充分拍干反應(yīng)板。
5,、除空白孔外,，每孔加入HRP標(biāo)記親和素100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育20min,。
6、重復(fù)步驟4,。
7,、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育15min。
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,，標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔,。
1、按前面說明書描述的方法,，配制好試劑盒各種組分的工作液,。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
3、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、yangben稀釋液孔,、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,，yangben稀釋液孔加yangben稀釋液50μL,，空白孔不加，樣本孔加待測(cè)樣本50μL,。除空白孔外,，每孔加入shengwusu抗體100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育60min,。
4、揭開封板膜,，棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)5次,。若使用自動(dòng)洗板機(jī),，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡30s的程序,，可以提高檢測(cè)的精度,。洗板結(jié)束，加底物前,，要在干凈不掉屑的紙上,，充分拍干反應(yīng)板。
5,、除空白孔外,，每孔加入HRP標(biāo)記親和素100uL，用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育20min,。
6、重復(fù)步驟4,。
7,、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應(yīng)板,，37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育15min。
8,、所有孔加入終止液50μL,，在450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。
備注：圖片僅供參考,。僅供科研,，不可用于臨床。
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