生物安全柜的使用及維護,，注意這些！
(一) 準備工作
1.在開始工作以前,，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。
2.將所有必需的物品置于安全柜內(nèi),，以盡可能減少雙臂進出前面開口的次數(shù)。物品放置要注意以下幾點：
①II級生物安全柜臺面前面和后面的進氣格柵不能被物品阻擋,。
②所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會阻擋后部格柵,。
③可產(chǎn)生氣溶膠的設備(如：混勻器,、離心機等)應靠近安全柜的后部放置,。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品,，應該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè),。
④潔凈的物品應放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外,，降低交叉污染的可能性。
⑤容易受紫外線損傷的實驗樣本可以在紫外線殺菌后的實驗之前放入,。
⑥不要在工作區(qū)內(nèi)排放過多的物品。
3.關閉操作前窗,，打開生物安全柜的紫外燈，對生物安全柜工作臺面,，側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進行殺菌處理,。
4.稍微打開操作前窗,，讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作。
(二) 操作注意事項
1.在使用生物安全柜時應穿著個體防護服并戴手套防止被污染,。在進行一級和二級生物安全水平的操作時,，可穿著普通實驗服。手套應套在實驗服袖口外面,。有些操作可能還需要戴口罩和護目鏡,。
2.在生物安全柜內(nèi),，避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響,，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時,，也易造成危險。在對接種環(huán)進行滅菌時,，可以使用紅外線電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán),。
3.手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過"手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進行處理,。
4.工作時，盡量減少手臂的移動,，移動時要緩慢,，防止干擾柜內(nèi)氣流。在移動雙臂進出安全柜時,，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應該與工作區(qū)開口垂直地緩慢進出前面的開口,。
5.在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行，所有操作在工作臺面的中后部進行,。
6.工作時，耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在安全柜內(nèi)不能拿出安全柜,，否則在使用這些物品時雙臂就頻繁進出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性,，從而影響對人員和物品的防護,。
7.一旦實驗過程中產(chǎn)生溢灑物,，用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
8.盡量使安全柜處于持續(xù)工作狀態(tài),，并對所有物品進行表面消毒處理,，提供大程度的人員保護,。從安全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時，要進行表面消毒處理,。
(三)使用完畢后的處理
1.系緊用過的生物廢物袋。
2.對安全柜內(nèi)壁,、后壁,、工作臺面和前窗內(nèi)側(cè)進行清潔和消毒處理,。
3.由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖,，因此在實驗結(jié)束時，包括儀器設備在內(nèi)的所有物品都應清除表面污染,，并移出安全柜,。
4.從安全柜內(nèi)移出手臂之前，要進行表面消毒處理,，然后垂直于工作區(qū)開口緩慢地移出,。
6.在每次使用后,，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進行擦拭,，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物,。在每天實驗結(jié)束時,，應擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染,。在對目標生物體有效時,，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,，還用無菌水再次進行擦拭。
7.關閉前操作窗口并開啟紫外燈,。
(四)生物安全柜內(nèi)溢灑的處理
處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內(nèi)，也不要將臉直接面對前操作口,，而應處于前視面板的后方,。選擇消毒滅菌劑時需要考慮其對生物安全柜的腐蝕性,。
如果溢灑的量不足1 ml時，可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭,。
如果溢灑量大或容器破損,，建議按如下操作：使生物安全柜保持開啟狀態(tài),；在溢灑物上覆蓋浸有消毒滅菌劑的吸收材料，作用時間以發(fā)揮消毒滅菌作用,，必要時,，用消毒滅菌劑浸泡工作表面以及排水溝和接液槽,；在安全柜內(nèi)對所戴手套消毒滅菌后，脫下手套,；如果防護服已被污染，脫掉所污染的防護服后,，用適當?shù)南緶缇鷦┣逑幢┞恫课?；穿好適當?shù)膫€體防護裝備，如雙層手套,、防護服、護目鏡和呼吸保護裝置等,；小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中,，并反復用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩余物質(zhì)吸凈；破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理,；用消毒滅菌劑擦拭或噴灑安全柜內(nèi)壁,、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè),；作用時間后,，用潔凈水擦干凈消毒滅菌劑；如果需要浸泡接液槽,，在清理接液槽前要先報告主管人員,；可能需要用其他方式消毒滅菌后再進行清理。如果溢灑物流入生物安全柜內(nèi)部,，需要評估后采取適用的措施,。
(五)定期維護
1.每三個月更換一次預過濾器,。
2.每年更換一次紫外燈,。
3.有下列情況之一時，應對生物安全柜進行現(xiàn)場檢測：生物安全實驗室竣工后,，投入使用前,，生物安全柜已安裝完畢；生物安全柜被移動位置后,；對生物安全柜進行檢修后,；生物安全柜更換高效過濾器后；生物安全柜一年一度的常規(guī)檢測?，F(xiàn)場檢測應由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對每一臺生物安全柜的運行性能以及完整性進行評估,，以檢查其是否符合標準要求。安全柜防護效果的評估應該包括對安全柜的完整性,、HEPA過濾器的泄漏、垂直氣流的速度,、工作窗口氣流流向和平均風速,、負壓/換氣次數(shù)、氣流的煙霧模式以及警報和互鎖系統(tǒng)進行測試,。還可以選擇進行漏電,、光照度,、紫外強度、噪音水平以及振動性測試,。在進行這些測試時,，檢測人員要經(jīng)過專門的培訓，采用專門的技術和儀器設備,。強烈建議由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行測試,。
每周采用空氣落菌數(shù)相似的方法進行無菌檢查,。
生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，清除污染,。常用的方法是采用甲醛熏蒸,應該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除污染,。
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