應(yīng)用固相萃取儀技術(shù)時(shí)的注意事項(xiàng)
1.盡量慢,。
我們?cè)谟霉滔噍腿x時(shí),,面臨的一個(gè)問題就是:液體應(yīng)該以什么速率過柱流出,我的經(jīng)驗(yàn)是,,要想效果好,,就要慢,盡量慢,。.
對(duì)于固相萃取儀柱中的填料,,我們?nèi)绻植糠糯蟮乜矗軌蚩吹狡鋵?shí)它們是有很多的空際,,液體流通的渠道很多,,如果流得快,相當(dāng)比例的待測(cè)組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,,給它們一個(gè)充分作用的機(jī)會(huì),。
如何慢呢?一個(gè)竅門就是不要用配合抽氣機(jī)使用的所謂固相萃取儀器,而采用再普通不過的重力法,。利用重力的作用使液體向下流出,。在實(shí)驗(yàn)速度上,,重力法遠(yuǎn)不如吸力法,但是在實(shí)驗(yàn)效果方面,,重力法遠(yuǎn)比吸力法優(yōu)勝,,用吸力法只能得到譜帶吸附,用重力法卻能得到柱頭吸附,,在速度和效果兩者的平衡中,,我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果。
舉例來說,,一個(gè)3ml500mg的C18小柱,,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至篩板時(shí)間約為20分鐘,,而在過樣品液時(shí),,25ml 的液體*多2小時(shí)可以流完,而且用重力法如果得當(dāng),,工作速率不比吸力法差很多,。因?yàn)槲覀兛梢猿浞掷每臻e時(shí)間,用吸力法*須有人在旁邊守候,,而重力法由于不需要用電,,可以充分利用午休和晚上時(shí)間過柱,,液體量大時(shí)接個(gè)堆疊接頭和延長管即可,,安排好實(shí)驗(yàn)步驟,工作效率一樣很高,。另外,,重力法不需要抽氣機(jī)和固相萃取儀器。
2.盡量少,。
在固相萃取儀條件選擇上,,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,,或選擇填料量大的小柱,,我覺得大可不*如此。尤其在用重力法時(shí),,由于效率高,,很多情況下是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用,,填料多了不僅液體流出速度會(huì)更慢,,而且在洗脫時(shí)的擴(kuò)散會(huì)很明顯。
n. com因此建議,,夠用就行,,在能保證效率時(shí),填料盡量少,加液也不宜多,。
3.實(shí)驗(yàn)條件不宜過分細(xì)化,。
固相萃取儀從原理上是色譜分離,但是在操作時(shí)*好只把它作為吸附萃取劑使用,,由于填料性質(zhì),、松緊常有差異,因此在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中不*因?yàn)樽非笮Ч?佳化而設(shè)計(jì)出很復(fù)雜的洗脫程序,。
在建立條件中,,我們應(yīng)該盡量多利用現(xiàn)成的資料,盡快地建立起體系,,同時(shí)要對(duì)操作過于復(fù)雜的步驟保持警惕性,,在實(shí)驗(yàn)效果,實(shí)驗(yàn)速率和易操作性三者中取得平衡點(diǎn),。
4.只用一次
固相萃取儀柱*好只用一.次,。因?yàn)閺膰?yán)格的意義上來說,很多物質(zhì)的吸附是不可逆的,,一次吸附,, 無法洗脫,影響著下一次吸附,,雖然有人做過重復(fù)利用的實(shí)驗(yàn),,但是總體來說為了節(jié)省- -點(diǎn)經(jīng)費(fèi)而大大增加了結(jié)果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為,。
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