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范式洗滌劑法--木質(zhì)纖維素測定標(biāo)準(zhǔn)方法

原理:
采用范式（Van Soest ）的洗滌纖維分析法測定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）原理：
植物性飼料經(jīng)中性洗滌劑煮沸處理，不溶解的殘渣為中性洗滌纖維,，主要為細(xì)胞壁成分，其中包括板纖維素,、纖維素,、木質(zhì)素和硅酸鹽,。植物性飼料經(jīng)酸性洗滌劑處理,，剩余的殘渣為酸性洗滌纖維,，其中包括纖維素,、木質(zhì)素和硅酸鹽,。酸性洗滌纖維經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣為木質(zhì)素和硅酸鹽,，從酸性洗滌纖維值中減去72%硫酸處理后的殘渣為飼料的纖維素含量,。將72%硫酸處理后的殘渣灰化,，在灰化過程中逸出的部分為酸性洗滌木質(zhì)素（SDL）的含量,。
溶劑配制：
中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）：準(zhǔn)備稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA,，C10H14O8Na2.2H2O，分析純）和6.8g硼酸鈉（Na2B4O7.10H2O,，分析純）放入燒杯中,，加入少量蒸餾水，加入溶解后,，再加入30g十二烷基硫酸鈉（C12H25NaO4S,，分析純）和10ml乙二醇乙mi（C4H10O2,分析純）；再稱取4.56g污水磷酸氫二鈉（Na2HPO4,，分析純）置于另一燒杯中，加入少量蒸餾水微微加熱溶解后,，倒入前一個燒杯中,，在容量瓶中稀釋至1000ml,，其中PH值約為6.9-7.1（PH一般勿需調(diào)整）,；1N硫酸：量取約27.87ml濃硫酸（分析純，比重1.84,，98%），徐徐加入已裝有500ml蒸餾水的燒杯中,，冷卻后注入1000ml容量瓶定容，標(biāo)定；酸性洗滌劑（2%十六烷三甲基溴化銨）：稱取20g十六烷三甲基溴化銨（CTAB,，分析純）溶于1000ml1N硫酸,，必要時過濾；
操作步驟：
準(zhǔn)確稱取1.0g樣品（通過40目篩）置于直筒燒杯中,，加入100ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉,。將燒杯套上冷凝裝置于電爐上，在5-10min內(nèi)煮沸,，并持續(xù)保持微沸60min,。趁熱用已知重量的玻璃坩堝抽濾，并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止,。用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為主,，并抽凈丙酮，將玻璃坩堝置于105度烘箱中烘2h后,，在干燥器中冷卻30min稱重,，直稱到恒重。
酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分（AIA）測定
將酸性洗滌纖維加入72%硫酸,，在20度消化3h后過濾，并沖洗至中性,。消化過程中溶解部分為纖維素,，不溶解的殘渣為酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分，將殘渣烘干并灼燒灰化后即可得出酸洗洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分的含量,。

實驗步驟
1,、 中性洗滌纖維測定
準(zhǔn)確稱取1.0g樣品W（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml中性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉,。
將燒杯套上冷凝裝置于電爐上,，在5-10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min,。（注意加水保持刻度在100ml）
煮沸完畢后,，取下直筒燒杯，趁熱用已知重量的玻璃坩堝W2進(jìn)行抽濾,，將燒杯中的殘渣全部移入,，并用沸水沖洗玻璃坩堝與殘渣，直洗至濾液呈中性為止,。
用20ml內(nèi)酮沖洗二次,，抽濾。
將玻璃坩堝置105度烘箱中烘2h后，在干燥器中冷卻30min稱重,，直稱至恒重W1,。
中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100

2,、 酸性洗滌纖維測定
準(zhǔn)確稱取1.0g樣品G（通過40目篩）置于直筒燒杯中，加入100ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉,。
將燒杯套上冷凝裝置于電爐上,，在5-10min內(nèi)煮沸，并持續(xù)保持微沸60min,。趁熱用已知重量的玻璃坩堝G2抽濾，并用沸水反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘渣至濾液呈中性為止,。
用少量丙酮沖洗殘渣至抽下的丙酮液呈無色為止,，并拍凈丙酮,。
將玻璃坩堝置于105度烘箱中烘2H后,，在干燥器中冷卻30min稱重,，直稱至恒重G1,。
酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
半纖維素含量的計算：ADS（%）=NDF（%）-ADF（%）

3,、 酸性洗滌木質(zhì)素和酸不溶灰分（AIA）測定
把酸性洗滌纖維置于50ml燒杯中,，加入5ml72%硫酸，20度水解3h,，然后加水45ml,，室溫過夜，次日用已稱恒重的3號砂芯漏斗H2過濾,，水洗殘渣使濾液至PH6.5,，于60度烘干，稱重H1,。把剩余殘渣在馬弗爐中550度經(jīng)2.5H灰化,，測得灰分重量H3,。
纖維素含量的計算：纖維素= ADF(%)-經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣（%） (H1-H2)/G*100
酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）含量的計算：ADF(%)=殘渣(%)-灰分（硅酸鹽，%）=(H1-H2-H3)/G*100



結(jié)果計算：
中性洗滌纖維含量的計算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100
式中：
W1-----玻璃坩堝和NDF重（g）
W2-----玻璃坩堝重（g）
W---試樣重（g）

酸性洗滌纖維含量的計算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
式中：
G1----玻璃坩堝和A
DF重（g）
G2-----玻璃坩堝重（g）
G---試樣重（g）

半纖維素含量的計算：半纖維素%=NDF(%)-ADF(%)
纖維素含量的計算：纖維素= ADF(%)-經(jīng)72%硫酸處理后的殘渣（%）
酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）含量的計算：ADF(%)=殘渣(%)-灰分（硅酸鹽,，%）