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SNP-M170-小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
  • SNP-M170-小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時(shí)間:2025-02-15 21:00:08

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尚恩生物依托國(guó)際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),,能夠?yàn)槟峁└咂焚|(zhì)的原代細(xì)胞、原代細(xì)胞提取物定制服務(wù),。集結(jié)豐富經(jīng)驗(yàn)的人才,,并配備了整套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,全程自主研發(fā),,嚴(yán)控開發(fā)流程,,保障產(chǎn)品質(zhì)量,,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,。已與國(guó)內(nèi)外多家科研單位,、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅(jiān)強(qiáng)后盾,。

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一、細(xì)胞基本屬性

貨號(hào):SNP-M170

產(chǎn)品名稱:小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

物種:小鼠

組織來源:冠狀動(dòng)脈

細(xì)胞簡(jiǎn)介:該細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織,;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,,行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型,、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支,。左冠狀動(dòng)脈為一短干,,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,,如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化,、超極化,,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖,、炎癥及凋亡等,。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,,對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用,。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。

方法簡(jiǎn)介:采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,。

配套體系:平滑肌體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNPM-M170)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,,吸走潤(rùn)洗的PBS,;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層,;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,;
6.混勻細(xì)胞,,900rpm離心3-5min,棄上清,;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),;
注意事項(xiàng)不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間

消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。


三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案


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等.....



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