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SNP-M147-小鼠角膜成纖維細胞
  • SNP-M147-小鼠角膜成纖維細胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時間:2025-02-14 21:00:07

瀏覽次數(shù):95

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( 聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,,謝謝?。?/p>

尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務,。集結豐富經(jīng)驗的人才,,并配備了整套實驗設備,全程自主研發(fā),,嚴控開發(fā)流程,,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務,,可以提供高質(zhì)量的小鼠角膜成纖維細胞,。已與國內(nèi)外多家科研單位,、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系,,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾,。

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---尚恩生物 ---

一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M147

產(chǎn)品名稱:小鼠角膜成纖維細胞

物種:小鼠

組織來源:眼角膜組織

細胞簡介:該細胞分離自眼角膜組織,;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛,。為了保持透明,,角膜并沒有血管,透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細胞層,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持角膜的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織,。

方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:成纖維體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠角膜成纖維細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M147)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS,;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,;
5.消化到細胞間隙變大,,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,,棄上清,;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,;
8.補足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三,、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞,;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,,第二天轉入液氮保存,;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,,及時調(diào)整實驗方案


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等.....




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