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尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,，能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞,、原代細胞提取物定制服務(wù),。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才，并配備了整套實驗設(shè)備,，全程自主研發(fā),，嚴控開發(fā)流程，保障產(chǎn)品質(zhì)量,，緊抓售后服務(wù),，可以提供高質(zhì)量的小鼠小腸隱窩上皮細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位,、藥企,、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系，成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾,。

---尚恩生物 ---

一、細胞基本屬性

貨號：SNP-M131

產(chǎn)品名稱：小鼠小腸隱窩上皮細胞

物種：小鼠

組織來源：小腸組織

細胞簡介：該細胞分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門,，下接盲腸,，分為十二指腸、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后,，基本上完成了消化過程,，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺,，其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞,、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞,。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運動功能,，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn),，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達,，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失,。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛,，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一,，以十二指腸和空腸頭段發(fā)達,。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀,，于回腸則細而短,。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,，又稱腸隱窩,，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開口于腸腔,。

方法簡介：采用先機械分離法,、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶,。

配套體系：上皮體系

發(fā)貨形式：T25瓶（1×106左右）

規(guī)格：5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件：具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境：37℃,，5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠小腸隱窩上皮細胞專用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNPM-M131）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

二,、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天

培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml

傳代比例1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；

2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,，吸走潤洗的PBS,；

3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層,；

4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,；

5.消化到細胞間隙變大，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,；

6.混勻細胞,，900rpm離心3-5min,，棄上清；

7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；

8.補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；

注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,，注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。

三,、細胞凍存操作

凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);

凍存規(guī)格200-300萬/ml，1ml每管

凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞,；

2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；

3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

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