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一,、細胞基本屬性
細胞名稱：小鼠raw264.7細胞
細胞別稱：RAW 264.7; RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7
細胞貨號：SNL-112
細胞種屬：小鼠
生長情況：半貼壁
培養(yǎng)條件：H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細胞培養(yǎng)操作
換液周期：2-3天
培養(yǎng)基體積：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例：1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法：
1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,，留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞,；
2.混勻細胞,，收集細胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min,，棄上清,；
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
4.補足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項：半貼壁細胞會附著瓶底,，但貼壁不緊,，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面就會脫落，不需要胰酶消化,。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。
三、細胞凍存操作
凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格：200-300萬/ml,，1ml每管
凍存方法：
1. 離心獲得細胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞,；
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,；
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
1.細胞半貼壁圓形或多角形生長,，部分懸浮圓形，傳代時均可收集培養(yǎng),，換液時將懸浮細胞離心收集后重新接回原瓶,，若貼壁細胞較多活性較好時可以不要懸浮的細胞；
2.該細胞對胰酶比較敏感,，胰酶消化后細胞形態(tài)會更多梭形,，貼壁變緊，傳代不建議使用胰酶消化該細胞,；
該細胞生長較快,，培養(yǎng)基消耗較快,，培養(yǎng)時注意密切關(guān)注細胞狀態(tài)，密度較高,、培養(yǎng)基有變黃趨勢時及時換液避免細胞狀態(tài)變差,；

我們推薦使用尚恩生物小鼠raw264.7細胞專用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-112）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。