MDA-MB-453（人乳腺癌細(xì)胞）是由RCailleau等在1976年從一位48歲女性腫瘤轉(zhuǎn)移患者胸水中建立的細(xì)胞株,，其它轉(zhuǎn)移灶包括淋巴結(jié)、腦和胸水及心包腔積水;MDA-MB-453細(xì)胞過(guò)表達(dá)FGF受體,。
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 ：人乳腺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱 ：MDA-MB-453; MDA-MB 453; MDAMB 453; MDA-MB453; MDAMB453; MDA-453; MDA453; MD Anderson-Metastatic Breast-453
細(xì)胞貨號(hào):SNL-056
細(xì)胞種屬 :人
生長(zhǎng)情況:貼壁
培養(yǎng)條件: L15+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境 :air, 100%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期 :2-3天
培養(yǎng)基體積 :T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml
傳代比例 :1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）
傳代方法 :
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,，吸走潤(rùn)洗的PBS,；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層,；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,；
5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,；
6.混勻細(xì)胞,，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項(xiàng) :不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 :92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格 :200-300萬(wàn)/ml，1ml每管
凍存方法 :
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過(guò)夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng) :凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,，若有異常,，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips：
1.L15培養(yǎng)基不需要5%二氧化碳，使用37度培養(yǎng)箱空氣培養(yǎng)即可,；
2.細(xì)胞生長(zhǎng)偏慢,，注意控制細(xì)胞密度不要過(guò)低；
我們推薦使用尚恩生物MDA-MB-453（人乳腺癌細(xì)胞）專用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：SNLM-056）作為體外培養(yǎng)MDA-MB-453（人乳腺癌細(xì)胞）的培養(yǎng)基,。
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