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一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:SNU-1（人胃癌細(xì)胞）
細(xì)胞別稱:SNU-1; SNU1; NCI-SNU-1
細(xì)胞貨號(hào):SNL-107
細(xì)胞種屬:人
生長情況:懸浮或半貼壁
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）
傳代方法:
1.混勻細(xì)胞,，收集細(xì)胞培養(yǎng)基,，900rpm離心3-5min，棄上清,；
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項(xiàng):部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落，不需要胰酶消化,。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細(xì)胞操作，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,，1ml每管
凍存方法:
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管,；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,；沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips：
1.細(xì)胞懸浮或半貼壁圓形生長,，偶有小聚團(tuán),；
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,，如果無法判斷,，可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率,；
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,，密度過低或者過高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)；

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