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貨物所在地：湖北武漢市
所在地： 武漢東湖高新區(qū)高新大道858號
更新時間：2025-01-18 21:00:08
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一,、細胞基本屬性
細胞名稱：SK-N-BE2（人神經(jīng)母細胞瘤細胞）
細胞別稱：SK-N-BE(2)
細胞貨號：SNL-093
細胞種屬：人
生長情況：貼壁
培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法:
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,，吸走潤洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶,，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層,；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,；
5.消化到細胞間隙變大，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,；
6.混勻細胞,，900rpm離心3-5min，棄上清,；
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
8.補足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項:不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,，1ml每管
凍存方法:
1. 離心獲得細胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,；
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項:凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
1.貼壁弱,，消化時間短,，注意控制消化時間；
2.細胞傳代容易成團聚集,，注意盡量吹散細胞,；細胞生長偏慢，注意控制細胞密度不要過低,；
我們推薦使用尚恩生物SK-N-BE2（人神經(jīng)母細胞瘤細胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-093）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
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