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貨物所在地：湖北武漢市
所在地： 武漢東湖高新區(qū)高新大道858號
更新時間：2025-06-05 21:00:08
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一,、細胞基本屬性
細胞名稱:KG-1a（人急性骨髓白血病細胞）
細胞別稱:KG-1a
細胞貨號:SNL-159
細胞種屬:人
生長情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法:
1.混勻細胞,，收集細胞培養(yǎng)基,，900rpm離心3-5min，棄上清,；
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
3.補足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項:部分懸浮細胞會附著瓶底，輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細胞面就會脫落,，不需要胰酶消化,。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細胞操作,，吹打細胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三,、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格：200-300萬/ml,，1ml每管
凍存方法：
1. 離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞,；
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,；
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
1.細胞懸浮圓形生長,，偶有小聚團,；
2.圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞,，如果無法判斷,，可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數(shù)確定細胞活率；
3.懸浮細胞密度維持1E5-5E5/ml之間,，密度過低或者過高可能會影響細胞狀態(tài),；
我們推薦使用尚恩生物KG-1a（人急性骨髓白血病細胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-159）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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