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貨物所在地:湖北武漢市
所在地: 武漢市尚恩生物技術(shù)有限公司
更新時(shí)間:2024-11-13 21:00:07
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一、細(xì)胞基本屬性 | |
細(xì)胞名稱 | 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞 |
細(xì)胞別稱 | AR42J |
細(xì)胞貨號(hào) | SNL-207 |
細(xì)胞種屬 | 大鼠 |
生長(zhǎng)情況 | 懸浮+部分貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | |
換液周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml售后 |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定) |
傳代方法 | 1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞,; 2.混勻細(xì)胞,,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,,棄上清,; 3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,; 4.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng); |
注意事項(xiàng) | 半貼壁細(xì)胞會(huì)附著瓶底,,但貼壁不緊,,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,不需要胰酶消化,。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),,更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。 |
三、細(xì)胞凍存操作 | |
凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml,,1ml每管 |
凍存方法 | 1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞; 2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管,; 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips:
1.細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),部分貼壁呈上皮狀,,傳代時(shí)貼壁部分可以不要,,也可以繼續(xù)培養(yǎng)用于收集懸浮細(xì)胞。,;
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