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當(dāng)前位置:目錄:武漢尚恩生物技術(shù)有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> SNP-M179小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞
  • 小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞
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  • SNP-M179 型號
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規(guī)格

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:T25瓶 貨號:SNP-M179 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2023-04-19 20:33:25瀏覽次數(shù):687評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
貨號 SNP-M179 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 實(shí)驗(yàn)
尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能夠?yàn)槟峁└咂焚|(zhì)的原代細(xì)胞,、原代細(xì)胞提取物定制服務(wù),。集結(jié)豐富經(jīng)驗(yàn)的人才,,并配備了整套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴(yán)控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞,。已與國內(nèi)外多家科研單位,、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅(jiān)強(qiáng)后盾,。

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一、細(xì)胞基本屬性

貨號:SNP-M179

產(chǎn)品名稱:小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

物種:小鼠

組織來源:椎間盤組織

細(xì)胞簡介:該細(xì)胞分離自椎間盤組織,;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,,由軟骨板、纖維環(huán),、髓核組成的一個(gè)密封體,。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,,下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,,而后側(cè)較薄,。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶,后側(cè)的后縱韌帶較窄,、較薄,。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3,其外層的細(xì)胞呈梭型,,主要屬于纖維細(xì)胞,,內(nèi)層細(xì)胞呈圓形,,主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下,,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),,它們的核較圓,核仁較明顯,。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,,有的可看到雙層單位膜,,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒,,纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,,保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,,纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱,,椎間盤開始退變。

方法簡介:采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶,。

配套體系:軟骨體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M179)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。


二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s,,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層,;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化,;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,,棄上清,;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間

消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。


三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管,;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案


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等.....


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