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CAL27人舌鱗癌細(xì)胞貼壁

CAL27人舌鱗癌細(xì)胞貼壁

---尚恩生物 186278592O3---

收貨處理方式（T25瓶/凍存管）

【T25】

①快遞保存溫度：室溫

②初步平衡：T25瓶表面消毒后，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上

③處理方式：吸走大部分培養(yǎng)基,，留10-12ml培養(yǎng)基,，拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上

④接種方式：T25傳代第①次建議1:2傳代,，即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項：若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮，T25瓶不開封,，放至37度培養(yǎng)箱過夜，若細(xì)胞貼壁即說明活性正常,，按正常操作消化傳代即可,；若未貼壁，收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,，將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,，同時原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,，可以收集起來，1500rpm離心5min后,，取上清4度保存,，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基

【凍存管】

①快遞保存溫度：液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)

②初步平衡：無須平衡,，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式：37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞,，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,，1min為宜,，棄上清，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,，顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照,，24h后換液一次

④接種方式：一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

⑤注意事項：收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存，以上情況及時反饋
干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,，長時間保存會出現(xiàn)活性下降,。干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支,，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支,。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,，我方將不提供免費售后服務(wù)

特殊情況：

1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況,，及時拍照聯(lián)系銷售反饋，按指導(dǎo)進行進一步處理,。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管,，請放心使用。

2.若無法觀察到細(xì)胞,，建議收集細(xì)胞培養(yǎng)基,，1200rpm離心5min，觀察細(xì)胞沉淀量,，并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后,，取部分懸液放到計數(shù)板或者載玻片上觀察細(xì)胞。

3.部分細(xì)胞增殖較快,，發(fā)貨細(xì)胞量較多時,，培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時，需要及時觀察培養(yǎng)基顏色變化,，縮短培養(yǎng)基換液周期,，并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。

4.收貨當(dāng)天不處理細(xì)胞時,，T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜,，但不建議超過24h,；凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內(nèi),，必須一周內(nèi)復(fù)蘇一只培養(yǎng)檢查，否則將超過一周售后期,。

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