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KATO III人胃癌細(xì)胞Kato細(xì)胞系

KATO III人胃癌細(xì)胞Kato細(xì)胞系

-----尚恩生物 186278592O3-----

一、細(xì)胞基本屬性

培養(yǎng)環(huán)境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

注意事項(xiàng)半貼壁細(xì)胞會附著瓶底，但貼壁不緊,，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落,，不需要胰M消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細(xì)胞操作,，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。

細(xì)胞培養(yǎng)說明

1. 細(xì)胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗(yàn),，新手或者沒有類似細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進(jìn)行操作，尤其注意無菌操作,、貼壁細(xì)胞消化時間及細(xì)胞培養(yǎng)密度,。

2. 部分細(xì)胞在傳代后時，會有以下現(xiàn)象：細(xì)胞內(nèi)會有黑色小點(diǎn),、細(xì)胞間隙有些顆粒物,、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞。以上都是細(xì)胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,，不影響細(xì)胞增殖和實(shí)驗(yàn),。

3. 細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡、細(xì)胞器折光或者細(xì)胞膜表面物質(zhì),，這個屬于細(xì)胞自身特性,，無法清除也無法改變，具體情況可以參考ATCC,、DSMZ等大型細(xì)胞庫細(xì)胞照片,。細(xì)胞外的黑色顆粒大部分是細(xì)胞碎片，可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗,；潤洗不能清除的可以消化細(xì)胞重新接種,，消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化，混勻細(xì)胞,，收集細(xì)胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,，棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞,，再離心后,，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,，如果平時碎片比較少,，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多,，建議PBS多洗幾次,。

4. 不同品牌胰M溶液成分不一樣，消化活性差別比較大,，更換胰M品牌時需重新摸索消化時間,，以消化到細(xì)胞間隙變大但未漂浮為準(zhǔn),，此時結(jié)束消化最佳，避免消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。細(xì)胞消化后比較脆弱,，吹打力度不要過大，不要產(chǎn)生過多氣泡,，否則會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),。

5. 不同細(xì)胞生長速度差異較大，所有細(xì)胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代,。正常培養(yǎng)時生長較慢,、密度較低的細(xì)胞需要傳代時按1:2傳代，生長較快,、密度較高的細(xì)胞可以按1:4傳代,。

6. 細(xì)胞生長偏慢時，可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,，待細(xì)胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回10%血清

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