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當前位置:目錄:武漢尚恩生物技術(shù)有限公司>>細胞系>>細胞>> SNL-082Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒

Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒
  • Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒
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參考價 1500
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
1500
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 SNL-082
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 武漢市
屬性

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>

更新時間:2023-05-30 09:55:25瀏覽次數(shù):658評價

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分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
貨號 SNL-082 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè),能源
主要用途 實驗
Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒
細胞名稱人肝癌細胞
細胞別稱Hep 3B2.1-7; Hep 3B2_1-7; Hep 3B2; HEP-3B2; HEP3B2;
細胞貨號SNL-082
細胞種屬人
生長情況貼壁

637626500720363713959.jpg

Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒

Hep 3B2.1-7人肝癌細胞試劑盒

---尚恩生物 186278592O3---

一、細胞基本屬性

細胞名稱人肝癌細胞
細胞別稱Hep 3B2.1-7; Hep 3B2_1-7; Hep 3B2; HEP-3B2; HEP3B2; Hep-3B; HEP-3B; Hep 3B; Hep3B; HEP3B
細胞貨號SNL-082
細胞種屬人
生長情況貼壁
培養(yǎng)條件EMEM(MEM+NEAA)+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,,吸走潤洗的PBS,;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層,;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化,;
6.混勻細胞,,900rpm離心3-5min,棄上清,;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),;
注意事項不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。
三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,;沒有程序凍存盒的實驗室,,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


細胞培養(yǎng)說明

1. 細胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗,,新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人建議在專業(yè)人士指導下進行操作,,尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度,。

2. 部分細胞在傳代后時,,會有以下現(xiàn)象:細胞內(nèi)會有黑色小點,、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞,。以上都是細胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,,不影響細胞增殖和實驗,。

3. 細胞內(nèi)的黑色顆粒是細胞外分泌泡,、細胞器折光或者細胞膜表面物質(zhì),這個屬于細胞自身特性,,無法清除也無法改變,,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片,。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,,棄上清,。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿,。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,,傳代時可以省略PBS重懸的步驟,;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次,。

4. 不同品牌胰M溶液成分不一樣,,消化活性差別比較大,更換胰M品牌時需重新摸索消化時間,,以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,,此時結(jié)束消化最佳,避免消化過度導致細胞死亡,。細胞消化后比較脆弱,,吹打力度不要過大,不要產(chǎn)生過多氣泡,,否則會嚴重影響細胞狀態(tài),。

5. 不同細胞生長速度差異較大,所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代,。正常培養(yǎng)時生長較慢,、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,,生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代,。

6. 細胞生長偏慢時,,可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復正常后換回10%血清


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等,。


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