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RKO人結(jié)腸腺癌細胞試劑盒
RKO人結(jié)腸腺癌細胞試劑盒
----尚恩生物 186278592O3----
RKO細胞是一個低分化的結(jié)腸癌細胞系,。RKO細胞含有野生型p53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRβ1),。RKO細胞的p53蛋白的水平高于RKO-E6細胞,,RKO細胞是RKO-E6細胞和RKO-AS45-1細胞的親本細胞系,。RKO細胞在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落,。
SKU: SNL-072
分類: 細胞系
標簽: 人源細胞系
收錄: ATCC
培養(yǎng)基: EMEM
來源: 結(jié)腸腺癌
一,、細胞基本屬性
細胞名稱:人結(jié)腸腺癌細胞
細胞別稱:RKO
細胞貨號:SNL-072
細胞種屬:人
生長情況:貼壁
培養(yǎng)條件:EMEM(MEM+NEAA)+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法:1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS,;
3.T25瓶加1ml左右胰M,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,;
5.消化到細胞間隙變大,,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;
6.混勻細胞,,900rpm離心3-5min,,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),;
注意事項不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,,1ml每管
凍存方法:1.消化并離心獲得細胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,;沒有程序凍存盒的實驗室,,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
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