![637626500720363713959.jpg](https://img80.chem17.com/24e8f035994b740aa2b0a67ad1924df54c0b8d08156942a4870b11e9b1b500a43a05d71921544c4f.jpg)
Daudi細(xì)胞培養(yǎng)人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞
Daudi細(xì)胞培養(yǎng)人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞
-----尚恩生物 I8627859203------
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
細(xì)胞別稱:Daudi; DAUDI; NK-10A; NK-10a; NK 10a; NK10a; GM03190; GM3190; GM17346
細(xì)胞貨號:SNL-039
細(xì)胞種屬:人
生長情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml,;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1. 混勻細(xì)胞,,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,,棄上清,;
2. 加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,;
3. 補足*培養(yǎng)基,,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項部分懸浮細(xì)胞會附著瓶底,,輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會脫落,,不需要胰M消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),,更適合吹打細(xì)胞操作,,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,;
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,,若有異常,,及時調(diào)整實驗方案
Tips:
1. 細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán),;
2. 圓形透亮,、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,,可以取少量細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色后計數(shù)確定細(xì)胞活率,;
3. 懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會影響細(xì)胞狀態(tài),;
我們建議使用尚恩生物Daudi(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-039)作為體外培養(yǎng)Daudi(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)的培養(yǎng)基,。
相關(guān)培養(yǎng)基均有售:
DMEM高糖
DMEM低糖
1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基
1640*培養(yǎng)基
FK12
IMEM
L15
McCoy's 5A
優(yōu)級胎牛血清
特級胎牛血清
新生牛血清
等...