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| CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25瓶 |
| 貨號 | SNL-020 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 實驗 |
-----尚恩生物 I8627859203-----
Ana1小鼠巨噬細胞ANA1動物細胞
Ana1小鼠巨噬細胞ANA1動物細胞
一、細胞基本屬性
二,、細胞培養(yǎng)操作
1.細胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗,，新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進行操作,，尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度,。
2.部分細胞在傳代后時,，會有以下現(xiàn)象：細胞內(nèi)會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物,、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞,。以上都是細胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象，不影響細胞增殖和實驗,。
3.細胞內(nèi)的黑色顆粒是細胞外分泌泡,、細胞器折光或者細胞膜表面物質(zhì)，這個屬于細胞自身特性,，無法清除也無法改變,，具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片,。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,，可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗；潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,，消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,，棄上清,。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后,，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿,。第二次PBS重懸是為了去除碎片,，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟,；如果碎片很多,，建議PBS多洗幾次。
4.不同品牌胰m溶液成分不一樣,，消化活性差別比較大,，更換胰m品牌時需重新摸索消化時間，以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,，此時結(jié)束消化最佳,，避免消化過度導(dǎo)致細胞死亡。細胞消化后比較脆弱,，吹打力度不要過大,，不要產(chǎn)生過多氣泡，否則會嚴重影響細胞狀態(tài),。
5.不同細胞生長速度差異較大,，所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時生長較慢,、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,，生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代,。
6.細胞生長偏慢時,，可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間，待細胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回10%血清,。
| 處理步驟 | T25瓶 | 凍存管 | |
| 1 | 快遞保存溫度 | 室溫 | 液氮長期保存或-80度3天以內(nèi) |
| 2 | 初步平衡 | T25瓶表面消毒后,，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上 | 無須平衡，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存 |
| 3 | 處理方式 | 吸走大部分培養(yǎng)基,，留10-12ml培養(yǎng)基,，拍照并觀察細胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上 | 37度水浴搖晃盡快融化細胞,，直接在凍存管內(nèi)將細胞離心,。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,，1min為宜，棄上清,，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,，顯微鏡下觀察細胞并拍照，24h后換液一次 |
| 4 | 接種方式 | T25傳代第①次建議1:2傳代,，即瓶T25傳成兩瓶 | 一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
| 5 | 注意事項 | 若細胞出現(xiàn)漂浮,，T25瓶不開封,，放至37度培養(yǎng)箱過夜，若細胞貼壁即說明活性正常,，按正常操作消化傳代即可,；若未貼壁，收集細胞培養(yǎng)基離心后,，將細胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,，同時原瓶還貼壁的細胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng) 發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基，可以收集起來,，1500rpm離心5min后,，取上清4度保存，用于培養(yǎng)細胞,，以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基 | 收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察,，若未融化可以將細胞按正常步驟保存,，以上情況及時反饋 干冰發(fā)貨的細胞只能在-80保存3天左右，長時間保存會出現(xiàn)活性下降,。干冰發(fā)貨均為兩支,，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支,。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,，我方將不提供免費售后服務(wù) |
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