當(dāng)前位置：目錄:武漢尚恩生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞系>>細(xì)胞>> SNL-018HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞HFL1細(xì)胞系
| 參考價(jià) | ￥ 1500 |
| 訂貨量 | ≥1瓶 |
| ￥1500 |
| ≥1瓶 |
更新時(shí)間：2023-05-31 10:50:08瀏覽次數(shù)：919評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25瓶 |
| 貨號(hào) | SNL-018 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),能源 |
| 主要用途 | 實(shí)驗(yàn) | 生長(zhǎng)情況 | 貼壁 |
-----尚恩生物 I8627859203------
HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞HFL1細(xì)胞系
HFL1人胚肺成纖維細(xì)胞HFL1細(xì)胞系
培養(yǎng)環(huán)境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、收貨處理方式（T25瓶/凍存管）
【T25】
①快遞保存溫度：室溫
②初步平衡：T25瓶表面消毒后,，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上
③處理方式：吸走大部分培養(yǎng)基,，留10-12ml培養(yǎng)基，拍照并觀察細(xì)胞,。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上
④接種方式：T25傳代第①次建議1:2傳代，即瓶T25傳成兩瓶
⑤注意事項(xiàng)：若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,，T25瓶不開封,，放至37度培養(yǎng)箱過夜，若細(xì)胞貼壁即說明活性正常,，按正常操作消化傳代即可,；若未貼壁，收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,，將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,，同時(shí)原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基，可以收集起來,，1500rpm離心5min后,，取上清4度保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞,，以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基
【凍存管】
①快遞保存溫度：液氮長(zhǎng)期保存或-80度3天以內(nèi)
②初步平衡：無須平衡,，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
③處理方式：37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心,。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,，1min為宜，棄上清,，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,，顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照，24h后換液一次
④接種方式：一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
⑤注意事項(xiàng)：收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,，以上情況及時(shí)反饋
干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,，長(zhǎng)時(shí)間保存會(huì)出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支,，若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支,。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方將不提供免費(fèi)售后服務(wù)
特殊情況：
1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況,，及時(shí)拍照聯(lián)系銷售反饋,，按指導(dǎo)進(jìn)行進(jìn)一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管,，請(qǐng)放心使用,。
2.若無法觀察到細(xì)胞，建議收集細(xì)胞培養(yǎng)基,，1200rpm離心5min,，觀察細(xì)胞沉淀量，并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后,，取部分懸液放到計(jì)數(shù)板或者載玻片上觀察細(xì)胞,。
3.部分細(xì)胞增殖較快，發(fā)貨細(xì)胞量較多時(shí),，培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象,。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時(shí)，需要及時(shí)觀察培養(yǎng)基顏色變化,，縮短培養(yǎng)基換液周期,，并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。
4.收貨當(dāng)天不處理細(xì)胞時(shí),，T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜,，但不建議超過24h；凍存管可以直接放液氮長(zhǎng)期保存或-80度3天以內(nèi),，必須一周內(nèi)復(fù)蘇一只培養(yǎng)檢查,，否則將超過一周售后期。
培養(yǎng)操作說明：
1.細(xì)胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗(yàn),，新手或者沒有類似細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進(jìn)行操作,，尤其注意無菌操作,、貼壁細(xì)胞消化時(shí)間及細(xì)胞培養(yǎng)密度,。
2. 部分細(xì)胞在傳代后時(shí)，會(huì)有以下現(xiàn)象：細(xì)胞內(nèi)會(huì)有黑色小點(diǎn),、細(xì)胞間隙有些顆粒物,、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞。以上都是細(xì)胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,，不影響細(xì)胞增殖和實(shí)驗(yàn),。
3. 細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡、細(xì)胞器折光或者細(xì)胞膜表面物質(zhì)，這個(gè)屬于細(xì)胞自身特性,，無法清除也無法改變,，具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞照片,。細(xì)胞外的黑色顆粒大部分是細(xì)胞碎片,，可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤(rùn)洗；潤(rùn)洗不能清除的可以消化細(xì)胞重新接種,，消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,，混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,，棄上清,。再加5ml PBS重懸細(xì)胞，再離心后,，用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿,。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時(shí)碎片比較少,，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟,；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次,。
4. 不同品牌胰m溶液成分不一樣,，消化活性差別比較大，更換胰m品牌時(shí)需重新摸索消化時(shí)間,，以消化到細(xì)胞間隙變大但未漂浮為準(zhǔn),，此時(shí)結(jié)束消化最佳，避免消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。細(xì)胞消化后比較脆弱,，吹打力度不要過大，不要產(chǎn)生過多氣泡,，否則會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),。
5. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度差異較大，所有細(xì)胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代,。正常培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)較慢,、密度較低的細(xì)胞需要傳代時(shí)按1:2傳代，生長(zhǎng)較快,、密度較高的細(xì)胞可以按1:4傳代,。
6. 細(xì)胞生長(zhǎng)偏慢時(shí)，可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時(shí)間,，待細(xì)胞狀態(tài)和生長(zhǎng)速度恢復(fù)正常后換回10%血清,。
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