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一,、細胞基本屬性
細胞名稱:RPMI 8226（人多發(fā)性骨髓瘤細胞）
細胞別稱:RPMI 8226; RPM.8226; RPMI8226; RPMl no 8226; 8226; RPMIl 8226/S; RPMI-8226S; RPMI8226/S; 8226/S; RoswellPark Memorial lnstitute 8226; GM02132; GM2132; GM 2132; Simpson
細胞貨號:SNL-181
細胞種屬:人
生長情況:半貼壁
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法:
1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,，留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞,；
2.混勻細胞,，收集細胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min,，棄上清,；
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
4.補足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項:半貼壁細胞會附著瓶底,，但貼壁不緊,，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面就會脫落，不需要胰M消化,。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,，1ml每管
凍存方法:
1.離心獲得細胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管,；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存,；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項:凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
1.細胞半貼壁圓形生長,，部分懸浮圓形,，傳代時均可收集培養(yǎng)，換液時將懸浮細胞離心收集后重新接回原瓶,，若貼壁細胞較多活性較好時可以不要懸浮的細胞,；
2.傳代有部分細胞碎片可以換液后用PBS潤洗細胞清除，使用的PBS需要恢復到室溫，加入時不要沖到細胞面,，潤洗盡量輕柔,；
3.該細胞生長偏慢，比較容易死亡,，不建議沒有相關細胞操作經(jīng)驗的客戶單獨培養(yǎng)該細胞,；

我們推薦使用尚恩生物RPMI 8226（人多發(fā)性骨髓瘤細胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-181）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。