日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:AtT-20（小鼠垂體瘤細(xì)胞）
細(xì)胞別稱:AtT20; AtT 20; ATT-20
細(xì)胞貨號:SNL-239
細(xì)胞種屬:小鼠
生長情況:聚團(tuán)懸浮
培養(yǎng)條件:F12K+15%HS＋2.5%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）
傳代方法:
1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,，留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞,；
2.混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)基,，900rpm離心3-5min,，棄上清,；
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
4.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項,；半貼壁細(xì)胞會附著瓶底，但貼壁不緊,，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落,，不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細(xì)胞操作,，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格：200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法：
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項：凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
細(xì)胞懸浮生長，大部分聚集成葡萄串狀生長,，太大團(tuán)塊應(yīng)及時吹散避免中央細(xì)胞營養(yǎng)不足死亡,，小團(tuán)塊無需處理。

我們推薦使用尚恩生物AtT-20（小鼠垂體瘤細(xì)胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-239）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。