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一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:KG-1（人急性髓系白血病細(xì)胞）
細(xì)胞別稱:KG1
細(xì)胞貨號(hào):SNL-180
細(xì)胞種屬:人
生長(zhǎng)情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）
傳代方法:
1.混勻細(xì)胞,，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min,，棄上清,；
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項(xiàng):部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底,，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,，不需要胰M消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),，更適合吹打細(xì)胞操作,，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬(wàn)/ml，1ml每管
凍存方法:
1.離心獲得細(xì)胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過(guò)夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常,，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips：
1.細(xì)胞懸浮圓形生長(zhǎng),，偶有小聚團(tuán)；
2.圓形透亮,、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,，如果無(wú)法判斷，可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率,；
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,，密度過(guò)低或者過(guò)高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)；

我們推薦使用尚恩生物KG-1（人急性髓系白血病細(xì)胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：SNLM-180）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。