| 分子式 |
BEWO |
供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
| 規(guī)格 |
T25 |
貨號 |
SNL-243 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 |
生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 |
科學(xué)研究 |
BEWO（人絨毛膜腫瘤細(xì)胞）取自人絨癌腦轉(zhuǎn)移組織,，在倉鼠頰囊移植傳代8年,。利用移植瘤組織進(jìn)行體外培養(yǎng),，建立細(xì)胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系,，JEG-3是其衍生克隆。Bewo細(xì)胞可以產(chǎn)生雌激素、孕激素,、雌酮、雌二醇,、雌三醇,、hCG、胎盤催乳素,、角蛋白等,。
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 ：BEWO（人絨毛膜腫瘤細(xì)胞）
細(xì)胞別稱： BEWO
細(xì)胞貨號 ：SNL-243
細(xì)胞種屬 ：人
生長情況 ：貼壁
培養(yǎng)條件： F12K+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境 ：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期： 2-3天
培養(yǎng)基體積 ：T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml
傳代比例： 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）
傳代方法：
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s，吸走潤洗的PBS,；
3.T25瓶加1ml左右胰m,，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細(xì)胞層；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,；
5.消化到細(xì)胞間隙變大,，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化；
6.混勻細(xì)胞,，900rpm離心3-5min,，棄上清；
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),；
注意事項 ：不同品牌胰m消化時間差別較大,，注意嚴(yán)格控制消化時間
消化傳代細(xì)胞時吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 ：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格： 200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法 ：
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜,，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項： 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案
我們推薦使用尚恩生物*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-243）作為體外培養(yǎng)BEWO（人絨毛膜腫瘤細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
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