分子式 |
ARPE-19 |
供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
規(guī)格 |
T25 |
貨號(hào) |
SNL-227 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 |
科學(xué)研究 |
ARPE-19(人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞):尚恩生物致力于為廣大藥物研發(fā),疫苗研發(fā)企業(yè),,醫(yī)院,高校等科研機(jī)構(gòu)工作者提供常用實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系,、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞,、細(xì)胞株等。傳代次數(shù)5代以內(nèi),,代次低,,狀態(tài)好,活性高,。選擇尚恩生物細(xì)胞系享受進(jìn)口品質(zhì),,國(guó)產(chǎn)價(jià)格,性價(jià)比*,。細(xì)胞系現(xiàn)貨發(fā)貨,,并全程免費(fèi)提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo),保您售后無(wú)憂,。
一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 :ARPE-19(人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞)
細(xì)胞別稱 :ARPE19; Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19; NTC-200; NTC200
細(xì)胞貨號(hào): SNL-227
細(xì)胞種屬 :人
生長(zhǎng)情況 :貼壁
培養(yǎng)條件 :H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境 :air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期: 2-3天
培養(yǎng)基體積: T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例 :1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法 :
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰m,,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細(xì)胞層,;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化;
6.混勻細(xì)胞,,900rpm離心3-5min,,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),;
注意事項(xiàng) 不同品牌胰m消化時(shí)間差別較大,,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
三,、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方: 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格 :200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法 :
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞,;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,,放入-80度冰箱過(guò)夜,,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng): 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
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