原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作：
一,、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
(1)儀器：凈化工作臺(tái)、離心機(jī),、恒溫水浴箱,、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱,、液氮冰箱
(2)玻璃器皿：吸管(彎頭,、直頭)、培養(yǎng)瓶,、玻璃瓶(250ml,、100ml)、廢液缸
(3)塑料器皿：吸頭,、槍頭,、膠塞、移液管(10ml),、15ml離心管,、凍存管(1～2ml)
(4)其他物品：微量加樣槍,、紅血球計(jì)數(shù)板、記號(hào)筆,、醫(yī)用橡皮膏,、移液槍
(5)試劑：PBS、小牛血清,、培養(yǎng)液,、雙抗(青霉素、鏈霉素),、胰蛋白酶(0.08%)
二,、操作步驟
(1)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中,，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化,。
(2)從37℃水浴中取出凍存管,，75%酒精**后,，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液,，加到離心管中,。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。
(3)離心,，1000rpm，5min,。PriCells推薦不離心,。
(4)棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,，計(jì)數(shù),，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶,，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細(xì)胞種類。
(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng),。
會(huì)員.png)
5
立即詢價(jià)
您提交后,，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)