大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織得到，視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,，由色素上皮細(xì)胞組成,，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視維,、視桿細(xì)胞層,、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)從狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)抱,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,，而視維細(xì)胞則在中心凹處最多,。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)機(jī)紅胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列，部分細(xì)胞聚集成團(tuán),，細(xì)胞呈圓形或橢圓形,，核圓且相對(duì)透明，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起:該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞,，在體外屬于不增殖群,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷,。
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰M,，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細(xì)胞層,；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
5.消化到細(xì)胞間隙變大,，但未脫落時(shí)加2-3ml培養(yǎng)基終止胰M消化,；
6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min,，棄上清,；
7.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,；
8.補(bǔ)足培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
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