體外培養(yǎng)動物細胞已經(jīng)有近百年的歷史,,但該技術(shù)真正得以廣泛應(yīng)用及各種類型組織細胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細胞體外生長需要的合成培養(yǎng)基的問世,。合成培養(yǎng)基是對細胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下的模擬。這種模擬不是被動的,、不加選擇的,,而是在體外反復(fù)實驗和篩選,進行強化和重新組合后形成的人工合成培養(yǎng)基,。
合成培養(yǎng)基種類很多,,據(jù)報道已有數(shù)十種,每種合成培養(yǎng)基最初都是為培養(yǎng)某種細胞而設(shè)計的,,但應(yīng)用后發(fā)現(xiàn)其他細胞也可以生長或經(jīng)改良也適合其他細胞的生長,。
01199培養(yǎng)基
199培養(yǎng)基是Morgan、Morton及Parker等人在1950年為培養(yǎng)雞胚細胞研制的,。最初是在Earle生理鹽水溶液的基礎(chǔ)上添加各種物質(zhì)如氨基酸,。維生素,然后又補加嘌呤,、喀啶,、膽固醇、ATP等進行試驗性研究,,并根據(jù)哺乳動物細胞的特點進一步完善其配方,。
199培養(yǎng)基含有69種成分,。其組成成分雖然很多,但單獨使用時只能維持細胞存活數(shù)天,,在加入血清后可以維持很多種細胞的生長,。由干成分較為復(fù)雜,現(xiàn)在一般應(yīng)用不多,。后在199基礎(chǔ)上改良研制了109合成培養(yǎng)基,,與199相比較效果較好。
02Eagle's培養(yǎng)液
Parker等根據(jù)氨基酸和維生素等物質(zhì)的生理含量制備出一種基本培養(yǎng)液,,后來Eagle等對來源于人的細胞株進行更深入的研究后發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)的氨基酸及維生素的含量比基本培養(yǎng)液中大1~5倍而且其中谷氨酰胺等13種氨基酸和8種維生素是必需的,,于是將這些物質(zhì)的濃度調(diào)整至接近胞質(zhì)內(nèi)含量的水平,制成了較低限度培養(yǎng)液(Eagle's minimum essential medium,MEM),,MEM是常用的培養(yǎng)液,。
后來研究人員在MEM基礎(chǔ)上又改良研究制成了BME (Basal Eagle medium)和 DMEM(Dulbecco MEM)兩種培養(yǎng)液。BME去除了MEM成分中的一部分必需氨基酸,,增添了一些非必需氨基酸,。DMEM是在MEM基礎(chǔ)上增加了各成分的用量,又可分為高糖型及低糖型,。高糖型含葡萄糖4500 mg/L,,低糖型含量為1000mg/L。高糖型適用于生長較快,,附著性差的腫瘤細胞,,例如雜交瘤中骨髓瘤細胞,DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞等的培養(yǎng),。
03RPMI 1640培養(yǎng)液
RPMI 1640是由Moor等研究成功的,,最初為培養(yǎng)小鼠白血病細胞的需要而制備。開始的配方特別適合懸浮細胞的生長,,主要針對淋巴細胞,,后經(jīng)幾次改良從 RPMI 1630、1634,,至RPMI 1640,。其組成較為簡單,但可以適應(yīng)很多種類細胞的生長,。不僅腫瘤細胞,,而且很多正常組織細胞都可用RPMI 1640進行體外培養(yǎng)。大多數(shù)實驗室數(shù)年來將RPMI 1640作為實驗和細胞維持的基本培養(yǎng)液,,用它培養(yǎng)了包括癌細胞和正常細胞在內(nèi)的數(shù)十種細胞,,無論是原代和長期傳代等效果都很好。目前RPMI 1640是應(yīng)用最為廣泛的培養(yǎng)基之一,。
04Ham培養(yǎng)液
1962年Ham研究了適合小鼠二倍體細胞克隆化的培養(yǎng)基,,將其命名為F7,,在此基礎(chǔ)上進行改良成為F10培養(yǎng)基,使之不僅適應(yīng)小鼠細胞,,而且也適用于人類二倍體細胞的培養(yǎng),。Ham 1965年繼續(xù)研究制成了F12培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基的特點是在配方中加入了一些微量元素和無機離子,,可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用,,特別適合進行單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,。
公 司 簡 介
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公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系,、原代細胞、胎牛血清,、培養(yǎng)基,、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購,;細胞庫凍存細胞系500余種,,同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類;公司還提供人源細胞系的STR鑒定,、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等,。
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