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動物細胞培養(yǎng)4大常用合成培養(yǎng)基

閱讀:1797      發(fā)布時間:2022-10-28
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體外培養(yǎng)動物細胞已經(jīng)有近百年的歷史,,但該技術真正得以廣泛應用及各種類型組織細胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細胞體外生長需要的合成培養(yǎng)基的問世。合成培養(yǎng)基是對細胞體內生存環(huán)境中各種已知物質在體外人工條件下的模擬,。這種模擬不是被動的,、不加選擇的,,而是在體外反復實驗和篩選,,進行強化和重新組合后形成的人工合成培養(yǎng)基。

合成培養(yǎng)基種類很多,,據(jù)報道已有數(shù)十種,,每種合成培養(yǎng)基最初都是為培養(yǎng)某種細胞而設計的,但應用后發(fā)現(xiàn)其他細胞也可以生長或經(jīng)改良也適合其他細胞的生長,。

01199培養(yǎng)基

199培養(yǎng)基是Morgan,、Morton及Parker等人在1950年為培養(yǎng)雞胚細胞研制的。最初是在Earle生理鹽水溶液的基礎上添加各種物質如氨基酸,。維生素,,然后又補加嘌呤、喀啶、膽固醇,、ATP等進行試驗性研究,,并根據(jù)哺乳動物細胞的特點進一步完善其配方。

199培養(yǎng)基含有69種成分,。其組成成分雖然很多,,但單獨使用時只能維持細胞存活數(shù)天,在加入血清后可以維持很多種細胞的生長,。由干成分較為復雜,,現(xiàn)在一般應用不多。后在199基礎上改良研制了109合成培養(yǎng)基,,與199相比較效果較好,。

02Eagle's培養(yǎng)液

Parker等根據(jù)氨基酸和維生素等物質的生理含量制備出一種基本培養(yǎng)液,后來Eagle等對來源于人的細胞株進行更深入的研究后發(fā)現(xiàn)胞質內的氨基酸及維生素的含量比基本培養(yǎng)液中大1~5倍而且其中谷氨酰胺等13種氨基酸和8種維生素是必需的,,于是將這些物質的濃度調整至接近胞質內含量的水平,,制成了較低限度培養(yǎng)液(Eagle's minimum essential medium,MEM),MEM是常用的培養(yǎng)液,。

后來研究人員在MEM基礎上又改良研究制成了BME (Basal Eagle medium)和 DMEM(Dulbecco MEM)兩種培養(yǎng)液,。BME去除了MEM成分中的一部分必需氨基酸,增添了一些非必需氨基酸,。DMEM是在MEM基礎上增加了各成分的用量,,又可分為高糖型及低糖型。高糖型含葡萄糖4500 mg/L,,低糖型含量為1000mg/L,。高糖型適用于生長較快,附著性差的腫瘤細胞,,例如雜交瘤中骨髓瘤細胞,,DNA轉染的轉化細胞等的培養(yǎng)。


03RPMI 1640培養(yǎng)液

RPMI 1640是由Moor等研究成功的,,最初為培養(yǎng)小鼠白血病細胞的需要而制備,。開始的配方特別適合懸浮細胞的生長,主要針對淋巴細胞,,后經(jīng)幾次改良從 RPMI 1630,、1634,至RPMI 1640,。其組成較為簡單,,但可以適應很多種類細胞的生長。不僅腫瘤細胞,,而且很多正常組織細胞都可用RPMI 1640進行體外培養(yǎng),。大多數(shù)實驗室數(shù)年來將RPMI 1640作為實驗和細胞維持的基本培養(yǎng)液,,用它培養(yǎng)了包括癌細胞和正常細胞在內的數(shù)十種細胞,無論是原代和長期傳代等效果都很好,。目前RPMI 1640是應用最為廣泛的培養(yǎng)基之一,。


04Ham培養(yǎng)液

1962年Ham研究了適合小鼠二倍體細胞克隆化的培養(yǎng)基,將其命名為F7,,在此基礎上進行改良成為F10培養(yǎng)基,,使之不僅適應小鼠細胞,而且也適用于人類二倍體細胞的培養(yǎng),。Ham 1965年繼續(xù)研究制成了F12培養(yǎng)基,,這種培養(yǎng)基的特點是在配方中加入了一些微量元素和無機離子,可以在加入很少血清的情況下應用,,特別適合進行單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),,是無血清培養(yǎng)中常用的基礎培養(yǎng)基。

公 司 簡 介

武漢尚恩生物技術有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城,,專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā),、生產(chǎn)和服務,公司建有標準化GMP實驗室,、動物房,,已整體通過ISO 9001:2015質量管理體系認證,獲得企業(yè),、3551人才,、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽,?! ?/p>

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞,、胎牛血清,、培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,,提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購,;細胞庫凍存細胞系500余種,同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類,;公司還提供人源細胞系的STR鑒定,、大小鼠的種屬鑒定服務等,?! ?/p>

公司細胞業(yè)務覆蓋國內各大高校生物實驗室、生物研究機構及一些生物科研,、診斷,、制藥公司,,不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品和服務!尚恩生物—您專業(yè)的細胞供應商,!

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