jurkat細(xì)胞冷凍保護(hù)體外培養(yǎng)物，除了必須有冷凍速率,、合適的冷凍保護(hù)劑和凍存溫度外,，在復(fù)蘇時(shí)也必須有合適的復(fù)溫速率，這樣才能保證獲得冷凍保存效果。復(fù)溫速率是指在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)溫度升高的速度,。復(fù)溫速率不當(dāng)也會(huì)降低凍存細(xì)胞存活率,。一般來(lái)說(shuō)，復(fù)溫速度越快越好,。常規(guī)的做法是,，在370C水浴中，于1-2分鐘內(nèi)完成復(fù)蘇,。復(fù)溫速度過(guò)慢,，細(xì)胞內(nèi)往往重新形成較大冰晶而造成細(xì)胞損傷。復(fù)溫時(shí)造成的細(xì)胞損傷非?？?，往往在極短的時(shí)間內(nèi)發(fā)生。
冷凍保護(hù)劑是指可以保護(hù)細(xì)胞免受冷凍損傷的物質(zhì),。冷凍保護(hù)劑常常配制成一定的溶液,。一般來(lái)講，只有紅細(xì)胞,、大多數(shù)微生物和極少數(shù)有核的哺乳動(dòng)物細(xì)胞懸浮在不加冷凍保護(hù)劑的水或簡(jiǎn)單的鹽溶液中,，并以合適的冷凍速率冷凍，可以獲得活的凍存物,。但對(duì)于大多數(shù)有核哺乳動(dòng)物細(xì)胞來(lái)說(shuō),，在不加冷凍保護(hù)劑的情況下，無(wú)最適冷凍速率可言,，也不能獲得活的冷凍物,。例如將小鼠骨髓細(xì)胞懸浮在不加冷凍保護(hù)劑的平衡鹽溶液中，并以0.3~6000C/min的冷凍速率降溫冷凍,，98%以上的細(xì)胞會(huì)死亡：而加入甘油冷凍保護(hù)劑進(jìn)行冷凍保存時(shí),，98%以上的細(xì)胞都可存活。
jurkat細(xì)胞冷凍保存方法：
按照冷凍保護(hù)液在凍結(jié)后是否形成冰晶來(lái)劃分,，凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種,。非玻璃化凍存是利用各種溫級(jí)的冰箱分階段降溫至-700C~-800C，然后直接投入液氮進(jìn)行保存：或者是利用電子計(jì)算機(jī)程控降溫儀以及利用液氮的氣,、液,，按一定的降溫速率從室溫降至-1000C以下，再直接投入液氮保存的方法,。以該種方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液或多或少都有冰晶的形成,。玻璃化凍存則是指利用多種高濃度的冷凍保護(hù)劑聯(lián)合形成的玻璃化冷凍保護(hù)液保護(hù)懸浮細(xì)胞，直接投入液氮進(jìn)行凍存的方法,。以該中方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液沒(méi)有冰晶的形成,。但目前細(xì)胞凍存常用的仍是前一種方法,。
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