原代細胞復蘇實驗準備:
(1)儀器：凈化工作臺,、離心機,、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡,、培養(yǎng)箱,、液氮冰箱
(2)玻璃器皿：吸管(彎頭、直頭),、培養(yǎng)瓶,、玻璃瓶(250ml、100ml),、廢液缸
(3)塑料器皿：吸頭,、槍頭、膠塞,、移液管(10ml),、15ml離心管、凍存管(1～2ml)
(4)其他物品：微量加樣槍,、紅血球計數(shù)板,、記號筆、醫(yī)用橡皮膏,、移液槍
(5)試劑：PBS,、小牛血清、培養(yǎng)液,、雙抗(青霉素,、鏈霉素)、胰蛋白酶(0.08%)
原代細胞復蘇操作步驟:
(1)從液氮容器中取出凍存管,，直接浸入37℃溫水中,，并不時搖動令其盡快融化。
(2)從37℃水浴中取出凍存管,，75%酒精消毒后，打開蓋子,，用吸管吸出細胞懸液,，加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶,，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。
(3)離心,，1000rpm，5min,。PriCells推薦不離心,。
(4)棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,，計數(shù),，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶,，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細胞種類。
(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng),。
注意事項:
(1)將凍存管從液氮容器中取出時，要做好防護工作,，以免凍傷,。
(2)取出凍存管后立即放入水浴中，使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi)),。
(3)復蘇好用新配制的培養(yǎng)液,。
5
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務