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游離脂肪酸對非洲綠猴腎細(xì)胞凋亡的影響

閱讀:1232      發(fā)布時間:2021-9-24
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  非洲綠猴腎細(xì)胞被成功的用來培養(yǎng)狂犬病疫苗,、乙腦疫苗等多種疫苗,,在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻(xiàn),在醫(yī)藥研究種廣泛應(yīng)用,。
  非洲綠猴腎細(xì)胞探討脂肪酸對細(xì)胞生長的影響,。利用不同種類不同濃度脂肪酸處理體外培養(yǎng)細(xì)胞,利用光鏡觀察細(xì)胞形態(tài),,后經(jīng)Hoechst/PI熒光染色和染色體DNA梯度電泳觀察細(xì)胞形態(tài)改變并確定細(xì)胞凋亡,;同時應(yīng)用蛋白免疫印跡反應(yīng)檢測淘亡相關(guān)Bc1-2、Bax,、Fas,、P53和Caspase-3蛋白質(zhì)表達(dá)水平。實驗結(jié)果:
 ?。?)光鏡觀察顯示:細(xì)胞經(jīng)脂肪酸處理后有形態(tài)上的改變,,細(xì)胞產(chǎn)生不同程度的破損,這種損壞程度隨脂肪酸濃度遞增而加強,。
 ?。?)Hoechst/Pl染色表明:飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸都可劑量依賴性的引起Vero細(xì)胞凋亡。隨濃度升高,,PI著色加深,,染色質(zhì)邊集;Hoechst著色漸淡,。
 ?。?)DNA凝膠電泳顯示:經(jīng)脂肪酸處理的細(xì)胞DNA呈明顯的梯度分子條帶,表現(xiàn)為典型的凋亡現(xiàn)象,,此現(xiàn)象隨處理濃度加大而加重,。
  (4)Western-blot分析結(jié)果表明:脂肪酸處理的細(xì)胞中,,Bcl-2,、Bax、Fas,、Caspase-3蛋白表達(dá)量發(fā)生改變,,其中Bax、Fas蛋白表達(dá)量隨濃度增加而顯著上調(diào),,同時,,Bc1-2蛋白含量有所降低,;另外,飽和脂肪酸處理組中P53蛋白表達(dá)并無太大差異,,而不飽和脂肪酸組P53含量以劑量依賴性上升,。
  實驗結(jié)果表明,隨著脂肪酸濃度的升高,,Vero細(xì)胞的凋亡程度有所增加,,有明顯凋亡現(xiàn)象。由于Bcl-2,、Bax,、Fas、Caspase-3和P53蛋白表達(dá)發(fā)生變化,,提示,,這些相關(guān)基因在脂肪酸誘導(dǎo)的Vero細(xì)胞凋亡過程中起到了重要的作用。

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