掃描電子顯微鏡樣品制備需根據(jù)樣品類型(如塊狀,、粉末、生物樣品等)采用不同方法,,并遵循干燥,、無油、導電的基本要求,,以下是一些具體的方法與技巧:
一、樣品基本要求
干燥:樣品必須充分干燥,,因為水蒸氣會加速電子槍陰極材料的揮發(fā),,降低燈絲壽命,同時散射電子束,,增加能量分散,,降低分辨能力。
無油:樣品表面不能含有有機油脂類污染物,,這些污染物在電子束作用下容易分解成碳氫化物,,對真空環(huán)境造成污染,降低成像質(zhì)量,。
導電性好:樣品必須具有良好的導電性,,否則在電子束反復掃描下,樣品表面電位會升高,,導致充電效應(yīng),,使圖像畸變。對于不導電或?qū)щ娦阅懿畹臉悠?,需要噴鍍一層導電膜?br />
二,、樣品制備方法
塊狀樣品
對于小塊或低分辨率樣品,,可以直接固定在碳導電膠帶上。
對于塊體較大或需要高分辨觀測的樣品,,可以采用碳/銀導電漿液進行固定,,或在碳導電膠帶固定后再在其四周刷上碳膠或銀膠,以增強導電與固定作用,。
塊狀樣品推薦冷凍脆斷或離子束拋光以保持截面平整,,便于觀察。
粉末樣品
常規(guī)粉體可以直接利用牙簽挑起后,,彈在導電膠帶上,,然后用洗耳球或壓縮空氣等吹掉浮粉。
較大粉體與不導電粉體,、磁性粉體,,可以將液態(tài)的碳膠或銀膠刷在樣品臺上,在未干之前利用牙簽挑起粉體彈在其上,,然后用洗耳球或壓縮空氣等吹掉浮粉,。
小顆粒粉體、易團聚粉體或需要進行顆粒度統(tǒng)計的粉體,,需要先利用其稀釋溶液對粉體進行稀釋超聲分散后才可進行觀測,。
生物樣品
微生物樣品含水量大,質(zhì)地軟,,干燥脫水易變形,,因此需要進行相應(yīng)的前處理。通常包括取樣,、固定,、沖洗、脫水,、置換,、干燥、粘樣,、噴金等步驟,。
對于動植物組織樣本,需要注意避免機械損傷,,取材后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫固定,,再轉(zhuǎn)移至低溫保存。
三,、掃描電子顯微鏡樣品制備技巧
清洗:樣品表面常常附著灰塵,、硅酸鹽或油污等污染物,需要在不破壞樣品表面構(gòu)造的前提下進行清洗,。
粘樣:使用導電膠帶或銀膠將樣品固定在樣品臺上時,,要確保導電通路良好,,避免接觸電阻過大。
鍍膜:對于不導電或?qū)щ娦阅懿畹臉悠?,需要噴鍍一層導電膜,。鍍膜材料可以選擇金、鉑,、碳等,,鍍膜厚度要適中,過厚會掩蓋樣品細節(jié),。
尺寸控制:樣品尺寸應(yīng)盡量小,,以減少抽真空時間并避免污染。多孔材料需預先烘干或低溫加熱,。
避免污染:在制備過程中要避免樣品受到污染,,特別是粉末樣品要避免相互污染。
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